[发明专利]一种制备斜生栅藻细胞原生质体的方法有效

专利信息
申请号: 201710722891.5 申请日: 2017-08-22
公开(公告)号: CN107299059B 公开(公告)日: 2020-08-25
发明(设计)人: 王长海;何梅琳;颜永全;宋虹;顾传坤 申请(专利权)人: 南京农业大学
主分类号: C12N1/12 分类号: C12N1/12;C12N13/00;C12R1/89
代理公司: 南京天华专利代理有限责任公司 32218 代理人: 徐冬涛;邢贤冬
地址: 211225 江苏省南京市溧*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开了一种斜生栅藻原生质体制备的方法,收集培养至对数生长期的斜生栅藻藻液,用超声波振荡器振荡,离心收集斜生栅藻细胞,用BG11培养基重悬得到斜生栅藻细胞悬液;采用从大型溞中提取的混合消化酶液,加入少量纤维素酶、果胶酶和高渗溶剂甘露醇和膜稳定剂CaCl2,与斜生栅藻细胞悬液混合,酶解消化斜生栅藻的细胞壁,获取原生质体。本发明方法应用的大型溞混合消化酶活力高,能在短时间,温和的条件下酶解斜生栅藻的细胞壁。通过该方法制备原生质体的效率可达70%,且原生质体活性较强,再生能力强。本发明为以斜生栅藻为目标的细胞融合及基因操作提供技术支持,亦可为研究微藻细胞的内吞作用提供可靠的原材料。
搜索关键词: 一种 制备 斜生栅藻 细胞 原生 质体 方法
【主权项】:
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