[发明专利]一种具有酶靶向性和缓控释特性的给药纳米粒的制备方法

摘要

本发明涉及一种具有酶靶向性和缓控释特性的给药纳米粒的制备方法，第一步，制备MPEG‑Peptide‑PCL；第二步，纳米粒的制备以姜黄素为模型药物，将mPEG‑Peptide‑PCL和姜黄素溶于丙酮为脂相溶液，优选吐温‑85、泊洛沙姆188(P‑188)或十二烷基磺酸钠等表面活性剂水溶液为水相，将脂相慢慢滴入水相，持续搅拌，形成载姜黄素‑星状纳米粒原液，将制得的纳米粒溶液真空抽滤1h除去有机溶剂，6000r/min离心20min后，取上清液即为纳米粒溶液。本发明的mPEG‑Peptide‑PCL纳米粒作为一种新型的具有酶响应靶向和缓释特性载体系统，可用于疏水抗癌药物的注射或口服缓释给药。

主权项

一种具有酶靶向性和缓控释特性的给药纳米粒的制备方法，其特征在于，所述制备方法步骤如下：第一步，mPEG‑Peptide‑PCL的制备(1)PCL‑NHtBoc的合成一定量N‑(叔丁氧羰基)乙醇胺和ε‑己内酯混合，辛酸亚锡为催化剂，在N2保护条件下120‑140℃油浴反应12‑24h，反应结束后，趁热用二氯甲烷溶解，然后逐滴加到冰甲醇中沉淀，抽滤，收集滤饼，并将产物置于40℃真空干燥箱干燥24小时至恒重，密封保存备用；(2)PCL‑NH2的合成取PCL‑NHtBoc溶于DCM，同时加入适量三氟乙酸，0℃搅拌反应3‑5h，反应结束后加DCM定容，用饱和NaHCO3溶液和蒸馏水各洗涤3次。取下层溶有产物的DCM层，然后逐滴加到冰乙醚中析出沉淀，抽滤，收集滤饼并将产物置于40℃真空干燥箱干燥24小时至恒重，密封保存备用；(3)mPEG‑COOH的合成取适量mPEG和丁二酸酐加入吡啶或DCM快速搅拌直至溶解，溶解后加入二甲氨基吡啶和三乙胺，在N2条件下室温反应24h，反应结束后，逐滴加到冰乙醚中沉淀，抽滤，所得滤饼即为产物，将产物置于25℃真空干燥箱干燥48小时至恒重，密封保存备用；(4)mPEG‑NHS的合成取mPEG‑COOH和N‑羟基琥珀酰亚胺，加入乙腈快速搅拌直至溶解，溶解后加入二环己基碳二亚胺，在N2条件下室温反应24h，反应结束后过滤，滤液逐滴加到冰乙醚中沉淀，所得滤饼即为产物，将产物置于25℃真空干燥箱干燥48小时至恒重，密封保存备用；(5)mPEG‑Peptide的合成取一定量的剪切肽、1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐和DMAP，用乙腈‑水溶液溶解，在N2保护下冰浴2h，随后，投入一定量的mPEG‑NHS，在N2保护下室温反应72h，反应结束后，将反应液置于分子截留量为3500的透析袋中透析48小时，透析结束后将透析袋中液体收集，冷冻干燥，即得mPEG‑Peptide；(6)mPEG‑Peptide‑PCL的合成称取适量mPEG‑Peptide、N，N‑二环己基碳二亚胺、N‑羟基琥珀酰亚胺用DCM溶解，在N2保护下冰浴2h，结束后，加入一定量的PCL‑NH2，在N2保护下室温反应96h，反应结束后，将反应液置于截留分子量为7000的透析袋中透析72小时，透析结束后将透析袋中液体收集，冷冻干燥，即得mPEG‑Peptide‑PCL；第二步，纳米粒的制备：以姜黄素为模型药物，将mPEG‑Peptide‑PCL和姜黄素溶于丙酮为脂相溶液，以表面活性剂的水溶液为水相，将脂相慢慢滴入水相，持续搅拌，形成载姜黄素‑星状纳米粒原液，将制得的纳米粒溶液真空抽滤1h除去有机溶剂，6000r/min离心20min后，获得溶液纳米粒溶液。