[发明专利]用于研究药物吸收的心肌纤维化细胞模型的建立方法在审

专利信息
申请号: 201710653003.9 申请日: 2017-08-02
公开(公告)号: CN107312750A 公开(公告)日: 2017-11-03
发明(设计)人: 高永林;李春梅;乔俊花 申请(专利权)人: 烟台大学
主分类号: C12N5/077 分类号: C12N5/077;G01N21/31;G01N27/04
代理公司: 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙)11369 代理人: 韩飞
地址: 264005 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要: 本案涉及一种用于研究药物吸收的心肌纤维化细胞模型的建立方法,包括以下步骤(1)将大鼠心肌成纤维细胞采用高糖DMEM培养传代;(2)构建心肌成纤维细胞模型;(3)洗涤心肌成纤维细胞模型;(4)测定心肌成纤维细胞模型的跨膜电阻值;(5)获得心肌纤维化细胞模型;(6)获得心肌纤维化细胞模型的空白对照样;(7)测定该心肌纤维化细胞模型和空白对照样的吸光度值,以判断心肌纤维化细胞模型是否建立成功。本发明以大鼠心肌成纤维细胞为基础,通过PDGF培养,建立了药物吸收的心肌纤维化细胞模型,操作简单,经济科学,可实现高通量测定,对心肌纤维化人群个体化用药,合理用药具有较大的促进作用。
搜索关键词: 用于 研究 药物 吸收 心肌 纤维化 细胞 模型 建立 方法
【主权项】:
用于研究药物吸收的心肌纤维化细胞模型的建立方法,包括以下步骤:(1)将大鼠心肌成纤维细胞采用高糖DMEM培养液于体积浓度为5%的CO2培养箱中培养传代;(2)取步骤(1)中第四代后生长良好的大鼠心肌成纤维细胞于24孔板的Transwell小室的滤膜上构建心肌成纤维细胞模型;(3)采用HBSS培养液洗涤步骤(2)得到的心肌成纤维细胞模型3‑5次;(4)测定步骤(3)所得的心肌成纤维细胞模型的跨膜电阻值;(5)取步骤(4)中跨膜电阻值大于500Ω的心肌成纤维细胞模型,加入到含有PDGF的HBSS培养液中培养24‑48h,获得心肌纤维化细胞模型;(6)另取步骤(4)中跨膜电阻值大于500Ω的心肌成纤维细胞模型加入到不含有PDGF的HBSS培养液中培养24‑48h,获得心肌纤维化细胞模型的空白对照样;(7)测定该心肌纤维化细胞模型和空白对照样的吸光度值,以判断心肌纤维化细胞模型是否建立成功。
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