[发明专利]一种利用酶标板和单克隆抗体进行混合物中各成分的分离方法有效
申请号: | 201710635986.3 | 申请日: | 2017-07-31 |
公开(公告)号: | CN107436350B | 公开(公告)日: | 2019-05-24 |
发明(设计)人: | 钱雯;陈玉秋;王丽丽;施競;陈南萍;熊应景 | 申请(专利权)人: | 云南沃森生物技术股份有限公司 |
主分类号: | G01N33/535 | 分类号: | G01N33/535;G01N33/577;G01N33/543 |
代理公司: | 昆明今威专利商标代理有限公司 53115 | 代理人: | 赛晓刚;廖萍 |
地址: | 650106 云南省昆明市高新技术*** | 国省代码: | 云南;53 |
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摘要: | 本发明公开了一种利用酶标板进行混合物中各成分的分离方法。所述分离方法操作如下:在酶标板上包被混合物中A成分的抗体,待测混合物中含A成分的物质结合后形成固定在板上的抗原‑抗体复合物,上清液中不含有A成分,从而分离出除A之外的其他成分。本发明提供更精确和特异的各成分分离方法,仅需同一种检测体系就可以将含同一成分的不同待测物分离和定量检测出来。所需待测样品体积大大减少,从毫升级减少到微升级;不需要复杂的设备投入,降低了检测成本,所需检测时间大大缩短,由3‑4天缩短至3‑4小时。检测精度大大提高,由微克级到纳克级。 | ||
搜索关键词: | 一种 利用 酶标板 单克隆抗体 进行 混合物 成分 分离 方法 | ||
【主权项】:
1.一种利用酶标板和单克隆抗体进行混合物中各成分的分离方法,其特征在于,混合物中含有游离抗原、游离载体和抗原‑载体结合物,分离游离载体时,通过在酶标板上包被抗原的单克隆抗体,待测物溶液含抗原成分的游离抗原和抗原‑载体结合物与对应的单克隆抗体结合后形成固定在板上的抗原‑抗体复合物,待测物中的游离抗原、抗原‑载体结合物吸附在酶标板中,上清液中仅含有游离载体,分离出游离载体进行检测;分离游离载体时进行梯度稀释待测物,找到让酶标板上将含抗原的成分完全形成抗原‑抗体复合物、上清中仅含有游离载体的稀释终点;找到稀释终点后,再使用酶标板和单克隆抗体进行游离载体的检测,取酶标板稀释终点下1‑2个稀释度的上清液按照竞争ELISA的方法或其它能进行含量检测的ELISA方法进行检测;同时用ELISA方法进行载体总含量的检测,通过标准曲线计算出待测物中游离载体的总含量。
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