[发明专利]一种培育近异源四倍体玉米材料的方法

摘要

本发明公开了一种培育近异源四倍体玉米材料的方法，该方法包括以自育的玉米异源六倍体为母本，以玉米为父本杂交，在F1代中选择花粉有育性的植株自交；然后对后代的根尖染色体数目和组成进行鉴定，并对花粉育性进行检测，选择符合目标植株自交，直至选出染色体总数为38～40条，其中含玉米染色体数22～28条、四倍体多年生类玉米染色体数为12～15条、指状摩擦禾染色体数为0～2条，并且花粉育性高的植株，即为本发明近异源四倍体玉米材料。本发明首次突破性地育成了非整倍性染色体情况下花粉可育的近异源四倍体玉米，可作为将玉米近缘野生种的有益基因转移到栽培玉米中的桥梁，并为玉米基因功能和育性研究提供了材料。

主权项

一种培育近异源四倍体玉米新材料的方法，其特征在于包括如下步骤：(1)、在吐丝散粉期，以MTF‑1(Tripsazea creammaize T.，2n＝76)为母本，以玉米(Zea mays L.,2n＝20)为父本进行杂交，成熟时收获种子，获得F1代；(2)、种植F1代，在抽雄期用碘‑碘化钾染色法对F1代材料进行花粉育性检测；选择花粉有育性的植株进行自交，成熟时收获种子，获得F2代；(3)、种植F2代，从三叶期开始至抽雄期前均可取根尖，采用基因组原位杂交的方法对根尖染色体数目和染色体组成进行鉴定，并对F2代植株的分蘖数进行调查；在抽雄期用碘‑碘化钾染色法对花粉育性进行检测；选择根尖染色体总数为41～43条，其中含有玉米(Zea mays L.)染色体数25～26条、四倍体多年生类玉米(Zea perennis L.)染色体数14～15条、指状摩擦禾(Tripsacum dactyloides L.)染色体数1～2条、分蘖数为1～3个，且花粉育性大于40％的植株进行自交，成熟时收获种子，获得F3代；(4)、种植F3代，按照步骤(3)所述的基因组原位杂交方法对根尖染色体数和染色体组成进行鉴定，并在抽雄期用碘‑碘化钾染色法对花粉育性进行检测；选择染色体总数为39～40条，其中含有玉米染色体数24～28条、四倍体多年生类玉米染色体数12～15条、指状摩擦禾染色体数0～2条，无分蘖、且花粉育性大于50％的植株进行自交，成熟时收获种子，获得F4代；(5)、种植F4代，按照步骤(3)所述基因组原位杂交方法对根尖染色体数和染色体组成进行鉴定，并在抽雄期用碘‑碘化钾染色法对花粉育性进行检测；检测结果中染色体总数为38～40条，其中含玉米染色体数为22～28条、四倍体多年生类玉米染色体数为12～15条、指状摩擦禾染色体数为0～2条，无分蘖、且花粉育性大于70％的植株；这种染色体总数在40条左右，且同时含有玉米、四倍体多年生类玉米或指状摩擦禾两个或两个以上物种染色体组的植株，即为本发明近异源四倍体玉米材料；对所选植株自交留种。