[发明专利]一种液相色谱测定孔雀石绿的方法

摘要

本发明公开了一种液相色谱测定孔雀石绿的方法，包括以下步骤：1)配制隐色孔雀石绿标准工作液；2)样品前处理；3)将步骤2所收集的液体进行高效液相色谱测定。所述液相色谱测定孔雀石绿的方法是基于国标GB/T 20361‑2006前处理方法的改良，用合并萃取的方式代替了繁琐的旋转蒸发步骤，减少了实验的整体耗时。改良法的加标回收率在74％‑95％之间，完全符合国标中70‑110％的要求，可用于实际水产品中残留孔雀石绿的测定。

主权项

一种液相色谱测定孔雀石绿的方法，其特征在于包括以下步骤：1)配制隐色孔雀石绿标准工作液；2)样品前处理,其包括步骤：2‑1)提取5g已捣碎样品于离心管A，加入500μL浓度为50ng/mL的隐色孔雀石绿标准工作液，静置10分钟，加入3mL硼氢化钾、4mL乙腈，超声波震动15分钟，振荡混合10分钟，再加2mL二氯甲烷、2.5mL对甲苯磺酸、1.5mL盐酸羟胺、5mL乙酸胺、振荡混合5分钟；2‑2)加入氧化铝6.10g、氯化钠4.9克，振荡混合5分钟，玻璃棒搅拌均匀；2‑3)保持5℃的温度，第一次8000转离心5min，取上层溶液至离心管B；在离心管A中加入4mL二氯甲烷,第二次8000转离心5分钟，取上层溶液至离心管B；再在离心管A中加入4mL二氯甲烷，第三次8000转离心5分钟，取上层溶液至离心管B；在离心管B中加入10mL蒸馏水，以8000转离心5分钟，然后去掉上清层得到提取液；2‑4)PRS柱下端接固相萃取装置，上端与酸性氧化铝固相萃取柱相连，将提取液以5mL乙腈活化后过PRS柱；提取液过柱后去除酸性氧化铝柱子，吹干PRS柱，将1.5mL乙腈和1.5mL的0.1mol/L乙酸铵溶液混合后过PRS柱；收集所有过柱液体待测定；3)将所收集的过柱液体进行高效液相色谱测定。