[发明专利]带永久电荷肼类糖标记物的制备方法及应用

摘要

本发明一种带永久电荷肼类糖标记物的制备方法，属于有机合成与生物信息技术领域。对氨基苯甲酸乙酯经过一系列合成，制备成带永久电荷肼类糖标记物，本发明制备的肼类化合物具有反应条件温和(5％乙酸，80℃，3小时)，可以显著提高灵敏度，且反应过后无需进一步纯化处理就可以直接用高效液相色谱和质谱(ESI‑MS，MALDI‑ToF‑MS)进行检测，灵敏度好。

主权项

一种带永久电荷肼类糖标记物的制备方法，其特征在于，该方法包括如下步骤：a、称取1g对氨基苯甲酸乙酯于二口圆底烧瓶中，加入40ml丙酮溶解，接着加入3.6g无水碳酸钾和14.1g碘甲烷，反应在氮气保护下于80℃搅拌回流24小时，反应完毕，过滤反应液，取滤液，用二氯甲烷萃取，有机相用硫酸镁除水，滤除硫酸镁后蒸发浓缩，产物用层析柱分离纯化，得到产物A；b、在产物A中按1:20摩尔比加入80％水合肼，95％乙醇为溶剂，反应在氮气保护下90℃回流反应，反应完成后层析柱纯化得到产物B；c、在产物B中加入按1.2倍摩尔比的二叔丁基二碳酸酯，以超纯水为溶剂，在室温下搅拌，反应50分钟，得产物C；d、在C产物中加入5倍摩尔比的碘甲烷，丙酮作溶剂，室温下搅拌并避光反应24小时，过滤，得产物D；e、在D产物中加入等摩尔量的三氟乙酸，反应用二氯甲烷作溶剂，室温下搅拌，反应1小时，反应液蒸干，而后再次加入适量甲醇溶解，用三乙胺调节反应液PH至8‑9，室温搅拌反应5分钟，除去溶剂得最终产物E；所述的反应步骤如下：