[发明专利]磁固相微萃取结合碳量子点荧光增敏检测牛奶中氧氟沙星方法

摘要

本发明公开了一种磁固相微萃取结合碳量子点荧光增敏检测牛奶中氧氟沙星的方法，采用聚乙烯亚胺为碳源及氮源，水热法合成氮掺杂荧光碳量子点；采用2‑(5‑溴‑吡碇偶氮)‑5‑二乙氨基苯酚及十二烷基硫酸钠修饰的四氧化三铁磁性纳米粒子为净化牛奶材料，氧氟沙星能增强氮掺杂荧光碳量子点的荧光，其增强的荧光信号强度与氧氟沙星浓度呈一定线性关系，据此建立了检测氧氟沙星的荧光分光光度法；本发明制备的氮掺杂荧光碳量子点对氧氟沙星有显著的荧光增敏作用，且选择性强，磁性纳米粒子有较好的净化作用，消除基体的干扰，方法用于氧氟沙星的荧光测定，具有灵敏度高、特异性的特点。

主权项

1.一种磁固相微萃取结合碳量子点荧光增敏检测牛奶中氧氟沙星的方法，其特征在于，具体步骤如下：/n(1)标准工作曲线的绘制：采用柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液配置8个浓度在0.01～10 µmol/L范围内的氧氟沙星标准溶液，每个标准溶液5mL，然后加入水溶性氮掺杂荧光碳量子点溶液，涡旋混匀静置后，于荧光分光光度计上，激发波长为344nm，发射波长为423nm测定荧光强度，以荧光增强强度对其相应浓度作图进行回归分析，即得标准工作曲线，由此得到氧氟沙星的线性回归方程；/n(2)样品制备：取5-10mL牛奶，加入10-15mL甲醇-水-甲酸提取液、l-3mL质量浓度4％的三氯乙酸乙腈溶液，涡旋1-3 min，超声5-10min，10000r/min下离心5-10 min，取上清液，避光保存于4℃冰箱待分析测定，其中甲醇-水-甲酸提取液是按体积比28:72:0.1的比例将甲醇、水、甲酸混匀制得；/n(3)样品测定：取步骤（2）的上清液，加入磁性纳米材料，涡旋使其充分混匀后，通过外加磁铁进行磁分离，弃去磁性纳米材料，取出上清液1-2mL，用柠檬酸-磷酸氢二钠缓冲液调pH至6.5-7.5并定容至5mL，加入水溶性氮掺杂荧光碳量子点溶液，涡旋混匀静置后，于荧光分光光度计上，激发波长为344nm，发射波长为423nm测定荧光强度，代入步骤(1)回归方程，计算出样品中氧氟沙星的含量；/n所述水溶性氮掺杂荧光碳量子点的制备方法为称取10.0-15.0g聚乙烯亚胺液体，加入到90mL超纯水中，超声5-10min使其充分混匀，并转移至聚四氟乙烯反应釜，于200-250℃加热5-10h，自然冷却至室温后，先用孔径为0.22μm滤膜过滤，后用截留分子量为3000-3500Da的透析袋进行透析处理24h，得到水溶性氮掺杂荧光碳量子点；/n所述磁性纳米材料的制备方法如下：/n（1）取2.05-2.50g硫酸亚铁铵和1.41-2.00g三氯化铁，用50mL去离子水溶解后，氮气保护下，水浴加热至75-85℃之后，加入5-7mL体积百分比浓度28%的氨水，继续搅拌反应30min，冷却至室温，用去离子水洗涤3次，在外加磁铁作用下分离，即得磁性Fe