[发明专利]一种五莲杨组织培养方法

摘要

本发明涉及植物组织培养领域，尤其是一种五莲杨组织培养方法。本发明提供一种五莲杨组织培养方法，包含以下步骤：选用芽茎段作为外植体，进行消毒灭菌操作，植入MS空白培养基中进行培养，培养时间是25d，进行启动培养得到初代苗，从初代苗中选取未玻璃化茎段接种于去玻璃化培养基中，进行去玻璃化培养35d，得到去玻璃化苗，将去玻璃化苗接种于增殖培养基中进行继代培养35d，得到继代苗，对继代苗进行生根培养获得生根苗，对生根苗进行炼苗移栽操作，得到健壮的五莲杨幼苗。本发明提供的组织培养方法操作简单，降低了五莲杨组培过程中玻璃化的发生率，降低五莲杨培育成本，推动五莲杨的商业化培养。

主权项

1.一种五莲杨组织培养方法，步骤如下：（1）初代培养：将外植体接种到初代培养基进行启动培养，得到初代苗，所述外植体选用1.5～2.0 cm的带芽茎段；（2）去玻璃化培养：将上一步得到的初代苗，接种于去玻璃化培养基中进行去玻璃化培养，得到去玻璃化苗；（3）增殖培养：将去玻璃化苗接种于增殖培养基中进行增殖培养，得到继代苗；（4）生根培养：将继代苗转入生根培养基中进行生根培养，得到生根苗； 所述初代培养基为，添加 25 g/L蔗糖 + 5.5 g/L琼脂粉的MS基础培养基， 调节PH值至5.8；所述去玻璃化培养基为，添加0.05 mg/L NAA + 0.4 mg/L 6‑BA + 30 g/L蔗糖 + 6.5 g/L琼脂粉的N减半MS培养基，调节PH值至5.8；所述增殖培养基为，添加0.03 mg/L NAA+ 0.4～0.5 mg/L 6‑BA + 30 g/L蔗糖 + 6.5 g/L琼脂粉的MS培养基，调节PH值至5.8；所述生根培养基为，添加0.05 mg/L NAA + 15 g/L蔗糖 + 6.5 g/L琼脂粉的1/2MS培养基，调节PH值至5.8。