[发明专利]一种用于紫斑牡丹与中原牡丹的分子鉴定方法在审
| 申请号： | 201710444509.9 | 申请日： | 2017-06-13 |
| 公开（公告）号： | CN107164498A | 公开（公告）日： | 2017-09-15 |
| 发明（设计）人： | 唐红;丑欢欢 | 申请（专利权）人： | 甘肃农业大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司11385 | 代理人： | 董芙蓉 |
| 地址： | 730070 甘肃省*** | 国省代码： | 甘肃;62 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种用于紫斑牡丹与中原牡丹的分子鉴定方法，该方法包括以下步骤对待鉴定样品进行DNA提取；PCR扩增；序列校正、比对；序列分析。本发明通过实验研究发现，紫斑牡丹的matK序列在第31bp和79bp两个位点处与所有中原牡丹序列发生差异，是最保守的2个差异位点，故这两个位点可作为鉴定紫斑牡丹和中原牡丹的信息位点。基于以上发现，本发明提供了matK序列作为DNA条形码在鉴定紫斑牡丹中的应用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 用于 紫斑 牡丹 中原 分子 鉴定 方法 | ||
【主权项】：
一种用于紫斑牡丹与中原牡丹的分子鉴定方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)对待鉴定样品进行DNA提取；(2)PCR扩增以步骤(1)提取的总DNA为模板，分别用matK序列的正向和反向引物进行扩增，P1 5’‑CCTATATCCGCTACTCCTTC‑3’和P2 5’‑CTCAGTGAATTTCACCACG‑3’，分别得到扩增产物；(3)序列校正、比对将来自GeneBank的紫斑牡丹matK序列AF033592.1与所有扩增后的样品序列，经过人工校正、对齐并除去引物区及测序质量较差区域的片段，最终获得干净、长度一致的序列进行比对；(4)序列分析利用MEGA5.05分析序列间的变异位点。
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