[发明专利]一种用于检测BRCA1和BRCA2基因大片段重组的引物组合、方法及试剂盒

摘要

本发明公开了一种用于检测BRCA1和BRCA2基因大片段重组的引物组合、方法及试剂盒，本发明的引物组合中的每对引物均可从BRCA1或BRCA2基因至少一个外显子所在区域扩增得到一个特征片段，特征片段长度各不相同，经过优化后，引物分为5组，进行多重PCR扩增，每组扩增产物的长度均具有差异。多重PCR以GeXP‑PCR方式进行，PCR反应前期为特征片段的线性特异扩增，后期以通用引物对特征片段进行无差别扩增。通用引物中的一条带上适宜的荧光修饰基团，即可于相应的毛细管电泳分析仪器上进行分析，获得各特征片段的相对含量信息，进而获得相应基因区域的大片段重组突变信息。本发明所提供的检测方法具有操作简单，成本低廉的优点，与普通的终点法多重PCR相比，解决了多重扩增偏好性问题，提高了可靠性。

主权项

一种用于检测BRCA1和BRCA2基因大片段重组的引物组合，其特征在于，所述引物组合包括：从其扩增区段包含BRCA1和BRCA2基因的各个外显子所在区域的特征片段的多对引物中获得五组引物对；其中，所述五组引物对是根据混合所述多对引物对BRCA1和BRCA2基因进行多重PCR扩增，并根据扩增片段长度差异及其在BRCA1和BRCA2基因上的分布优化；其中，所述五组引物对中，每组引物对中的每对引物所扩增的扩增产物长度均不相同，且每个扩增产物均对应BRCA1和BRCA2基因上的至少一个外显子区域，从而通过检测扩增产物的峰高即可获得BRCA1和BRCA2基因大片段重组的信息。