[发明专利]检测人体尿液中新蝶呤和生物蝶呤的方法有效

专利信息
申请号: 201710373546.5 申请日: 2017-05-24
公开(公告)号: CN107290444B 公开(公告)日: 2019-12-06
发明(设计)人: 陈静宜;程雅婷;陈智;刘伟霞;赵蓓蓓;李维;佘旭辉;禤学怡;李卓阳;董衡;沙小花 申请(专利权)人: 广州金域医学检验中心有限公司
主分类号: G01N30/02 分类号: G01N30/02
代理公司: 44205 广州嘉权专利商标事务所有限公司 代理人: 许飞<国际申请>=<国际公布>=<进入国
地址: 510005 广东省广州*** 国省代码: 广东;44
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摘要: 发明公开了一种准确、快速、高通量检测人体尿液中新蝶呤和生物蝶呤的方法,包括将前处理后的尿样以液相色谱进行分析,色谱柱为反向键合硅胶柱;流动相为甲醇和乙酸铵缓冲液,梯度洗脱;之后以荧光检测器检测。本发明方法成本低,前处理简单,可实现批量处理检测,优化色谱方法缩短了分析时间,大大提高样本通量,特别适用于临床和日常检测对色谱方法的需求。
搜索关键词: 检测 人体 尿液 蝶呤 生物 方法
【主权项】:
1.一种检测人体尿液中新蝶呤和生物蝶呤的方法,包括如下步骤:/n1)前处理:对尿液进行液相检测前处理;/n2)液相洗脱:将前处理后的尿样以液相色谱进行分析,所述分析条件为:/n固定相:色谱柱为反向键合硅胶柱;/n流动相:A相为甲醇;B相为15~25 mmol/L的乙酸铵缓冲液,并以乙酸调pH 5.5~7.0;梯度洗脱方式;/n3)检测:以荧光检测器检测;/n所述前处理步骤之前,还包括预处理步骤,所述预处理步骤为:尿液收集后立即加入5~7M的盐酸,冷冻避光保存;/n所述液相洗脱步骤中:/n所述色谱柱为Poroshell 120 EC-C18;/n所述梯度洗脱方式为:/n 时间 (分钟) 流动相 A%* 流动相 B%* 0.00 0 100 2.5 0 100 4.0 10 90 4.5 90 10 6.5 90 10 7.0 0 100 8.5 0 100
/n色谱柱的柱温为28~32℃;/n流动相的流速为0.3~0.5 mL/min;/n液相洗脱时的进样量为0.5~2μL;/n检测条件为:激发光波长为358~362nm,发射光波长为448~452nm;/n在进行液相洗脱时,间歇性对色谱柱进行冲柱;/n进样盘的温度为2~6℃。/n
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