[发明专利]一套基于化脓性链球菌的碱基编辑系统及其在基因编辑中的应用有效
| 申请号： | 201710326650.9 | 申请日： | 2017-05-10 |
| 公开（公告）号： | CN107384920B | 公开（公告）日： | 2020-07-14 |
| 发明（设计）人： | 黄军就;松阳洲;梁普平 | 申请（专利权）人： | 中山大学 |
| 主分类号： | C12N15/113 | 分类号： | C12N15/113;C12N15/90;C12N9/22 |
| 代理公司： | 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 | 代理人： | 陈卫 |
| 地址： | 510275 广东*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一套基于化脓性链球菌Cas9的精确的碱基编辑系统及其在哺乳动物细胞和/或胚胎基因编辑中的应用。所述碱基编辑系统由rAPOBEC1:Cas9:UGI表达载体和gRNA表达载体两部分组分组成；所述rAPOBEC1:Cas9:UGI表达载体是通过基因合成和分子克隆的方法将rAPOBEC1:Cas9:UGI的编码基因克隆到pcDNA3.1（‑）载体中得到；所述gRNA表达载体是通过酶切连接的方式将gRNA序列克隆到包含T7启动子的pDR274载体中得到。该系统能够应用于基因修饰、哺乳动物细胞模型、动物模型的构建，以及用于哺乳动物细胞和胚胎的基因治疗，具有很好的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 一套 基于 化脓 链球菌 碱基 编辑 系统 及其 基因 中的 应用 | ||
【主权项】：
一套基于化脓性链球菌的碱基编辑系统，其特征在于，所述碱基编辑系统由rAPOBEC1:Cas9:UGI和gRNA表达载体两部分组分组成；所述rAPOBEC1:Cas9:UGI为rAPOBEC1:Cas9:UGI表达载体、rAPOBEC1:Cas9:UGI mRNA或rAPOBEC1:Cas9:UGI蛋白；所述rAPOBEC1:Cas9:UGI表达载体是通过基因合成和分子克隆的方法将rAPOBEC1:Cas9:UGI的编码基因克隆到pcDNA3.1（‑）载体中得到；所述gRNA表达载体是通过酶切连接的方式将SEQ ID NO.15所示RNA序列克隆到包含T7启动子的pDR274载体中，并将其线性化，然后再以该线性化载体为模板制备得到。
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