[发明专利]一种模拟人工假体材料体外染菌所致大白兔感染的动物模型构建方法

摘要

本发明公开了一种模拟人工假体材料体外染菌所致大白兔感染的动物模型构建方法，该方法包括如下步骤（1）动物的选择及饲养条件；（2）菌种的选择及培养；（3）动物麻醉；（4）人工假体材料体外染菌过程的模拟；（5）动物染菌模型建立；（6）术后动物观察；（7）动物染菌模型评价。本发明通过构建一种实用、可行的大白兔感染动物模型，为人们研究人工假体材料体外染菌所致的细菌感染提供动物实验模型以及检测指标。

主权项

一种模拟人工假体材料体外染菌所致大白兔感染的动物模型构建方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）动物的选择及饲养条件：挑选新西兰大白兔在室温通风条件下饲养与实验；（2）菌种的选择及培养：首先用接种环轻挑斜面金黄色葡萄球菌加入到营养肉汤培养基培养，至细菌达到中等浓度，然后，在无菌条件下通过划线方法接种于营养琼脂板上，再用接种环挑取单个菌落，接种于新的营养肉汤培养基中，将菌管放入恒温摇床中培养，此时细菌处于稳定生长期，次日，采用麦氏比浊法，用新鲜营养肉汤培养基调节细菌浓度；（3）麻醉：新西兰大白兔麻醉之前称量体重，配合使用戊巴比妥钠和速眠新麻醉剂对动物实施麻醉，给药时观察肌肉紧张程度，角膜反射情况，当肌肉紧张程度与角膜反射情况较弱或消失时即完全麻醉；（4）人工假体材料染菌过程的模拟：棒状钛金属经无菌处理后，置于无菌离心管内，浸没于步骤（2）制备的金黄色葡萄球菌溶液中，其后将含有菌液和材料的EP管放在恒温培养箱中培养；（5）动物染菌模型建立：将新西兰大白兔成功麻醉后，固定于手术台上，沿小腿胫骨内侧至膝关节周围剃毛，采用碘伏溶液对手术区域皮肤消毒，自右胫骨干骺端纵行切开，显露近侧干骺端，经骨钻造孔至骨髓腔，而后放出少量骨髓，从钻孔处注入鱼肝油酸钠注射液，后将步骤（4）所得浸泡菌液后的假体材料植入胫骨缺损处，骨蜡封闭，手术缝合；（6）术后动物观察：待实验新西兰大白兔麻醉清醒后单笼饲养，笼内自由活动空间合适，饲养标准均统一，术后不使用任何抗菌药物；（7）动物染菌模型的评价：观察新西兰大白兔的体征情况，进行血液常规指标检测、微生物学检测、病理组织观察。