[发明专利]一种从中药猪苓中分离麦角甾醇和星鱼甾醇对照品的方法

摘要

本发明公开了一种从中药猪苓中分离麦角甾醇和星鱼甾醇对照品的方法，方法以多孔菌科Polyporaceae多孔菌属Polyporus药用真菌猪苓Polyporus(pers.)干燥菌核体为原材料，经过醇液提取，石油醚除杂，二氯甲烷萃取，SephadexLH‑20柱层析、重结晶及半制备得到麦角甾醇(ergosterol)和星鱼甾醇(Stellasterol)的高纯度单体化合物。本发明方法简单可靠，原料易得，经济成本较低，并适用于大规模制备麦角甾醇和星鱼甾醇对照品；且在提取和结晶时均采用乙醇或甲醇对环境的污染小；本发明所采用结晶或制备方法缩短了样品分离纯化时间，降低了人力和物力的花费，提高了经济效应。

主权项

一种从中药猪苓中分离麦角甾醇和星鱼甾醇对照品的方法，其特征在于，以猪苓药材醇提物为原料，经石油醚除杂，二氯甲烷萃取、柱层析分离、重结晶及反相高效色谱制备可获得纯度大于98％对照品，具体步骤为：(1)将猪苓破碎并过药筛，加入5～10倍量体积浓度不低于95％的甲醇或乙醇溶液，采用渗漉或加热回流法提取，回收溶剂得浸膏；将所得浸膏用蒸馏水分散，再依次用石油醚、二氯甲烷或萃取，回收并浓缩二氯甲烷萃取液至稠膏；(2)将所得稠膏用3～5倍体积的蒸馏水洗脱除去杂质，将滤渣用Sephadex LH‑20柱层析，再用二氯甲烷或氯仿：甲醇(1:1)等度洗脱，收集颜色较浅流分，回收洗脱液，得甾醇物质粗品；(3)将甾醇粗品用无水甲醇或乙醇溶解，过滤；取滤液样本加热、超声条件下使之完全溶解，达饱和状态后，放冷至析出白色针状结晶即为麦角甾醇和星鱼甾醇混合样品；(4)将步骤(3)所得混合样品溶解于色谱甲醇或色谱乙腈，然后用反相高效液相色谱法进行纯化；合理收集吸收主峰所对应的保留时间内的制备液，减压浓缩回收后，冻干即得相应的麦角甾醇和星鱼甾醇对照品。