[发明专利]一种α-葡萄糖苷酶的高效制备方法有效
| 申请号： | 201710281060.9 | 申请日： | 2017-04-26 |
| 公开（公告）号： | CN106978409B | 公开（公告）日： | 2020-09-11 |
| 发明（设计）人： | 牛丹丹;叶秀云 | 申请（专利权）人： | 福建福大百特生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/26 | 分类号： | C12N9/26;C12N15/56;C12N15/75 |
| 代理公司： | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人： | 蔡学俊 |
| 地址： | 352251 福建*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： |
本发明提供的是一种α‑葡萄糖苷酶的高效制备方法，以微生物或植物来源的α‑葡萄糖苷酶基因碱基序列为依据，筛选获得催化性能显著提升的α‑葡萄糖苷酶编码基因，然后再通过引入强启动子和高分泌效率信号肽元件，借助重构的表达质粒增加α‑葡萄糖苷酶基因拷贝数，获得了高效分泌表达α‑葡萄糖苷酶的重组菌，结合酶活力差异性筛选获得活力最高的菌株；结合该菌株的生长特征和产酶特征建立30m |
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| 搜索关键词： | 一种 葡萄 糖苷酶 高效 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种α‑葡萄糖苷酶的高效制备方法，其特征在于：以微生物或植物来源的α‑葡萄糖苷酶基因碱基序列为依据，参考目标宿主菌的密码子偏好性进行密码子优化并通过采用长引物和低温易错PCR的筛选获得催化性能显著提升的α‑葡萄糖苷酶编码基因，然后再通过引入强启动子和高分泌效率信号肽元件，借助重构的表达质粒增加α‑葡萄糖苷酶基因拷贝数，获得了高效分泌表达α‑葡萄糖苷酶的重组菌，结合酶活力差异性筛选获得活力最高的菌株；结合该菌株的生长特征和产酶特征建立30m3发酵体系下的α‑葡萄糖苷酶高效分泌表达方法。
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