[发明专利]一种测定BACE1酶切NRG1活性的检测方法及其试剂盒

摘要

BACE1能在NRG1的距离跨膜区10个残基的EF和ME区域之间特定序列，对NRG1进行酶切，本发明发现BACE1酶的该活性与精神分裂症的发病与否，以及病程和严重程度密切关联。在此基础上，本发明提供了一种含有“EFME”序列的BACE1酶切多肽底物、含有该底物的组合物和试剂盒，以及该底物在检测样品中BACE1酶切NRG1活性的检测中的应用。所述应用能用于精神分裂症的诊断，解决了目前精神分裂症诊断缺乏有效的分子诊断标准的问题。

主权项

1.BACE1酶切多肽底物在制备精神分裂症诊断试剂或试剂盒中的应用，所述BACE1酶切多肽底物的结构式为：R1‑R2‑EFME‑R3‑R4，其中R2为0‑8个氨基酸；R3为0‑8个氨基酸；当R1为荧光发射基团时，R4为荧光猝灭基团或荧光发射基团；或者，当R1为荧光猝灭基团时，R4为荧光发射基团；R1连接到R2的氨基上，R4连接到R3的羧基或非α‑氨基的氨基上；E为谷氨酸，F为苯丙氨酸，M为甲硫氨酸；优选R2为：含有‑GI‑序列的2‑8个氨基酸；更优选为含有‑GI‑序列的2‑5个氨基酸；最优选为‑GI‑；其中G为甘氨酸，I为异亮氨酸；优选R3为：含有‑AE‑序列的2‑8个氨基酸；更优选为含有‑AE‑序列的2‑5个氨基酸；最优选为‑AEK‑；其中A为丙氨酸，E为谷氨酸，K为赖氨酸；优选所述荧光发射基团为：罗丹明类化合物、荧光素类化合物、BODIPY类化合物、EDANS类化合物、香豆素类化合物、对甲氨基酚类化合物、花菁类化合物、吖啶类化合物、异吲哚类化合物、丹酰类化合物、氨基邻苯二甲酸酰肼类化合物、邻氨基苯甲酸类化合物、氨基邻苯二甲酰亚胺类化合物、氨基萘二甲酰亚胺类化合物、氨基苯并呋喃类化合物、氨基喹啉类化合物或二氰基氢醌类化合物；优选为鲁米诺、异鲁米诺、罗丹明110、罗丹明6G、罗丹明123、罗丹明B、羧基四甲基罗丹明、荧光素、异硫氰酸荧光素、5‑羧基荧光素、6‑羧基荧光素、四氯荧光素、六氯荧光素、羧基‑4',5'‑二氯‑2',7'‑二甲氧基荧光素、或邻氨基苯甲酸(Abz)；优选所述荧光猝灭基团为：硝基苯基、硝基苄氧基羰基、硝基苯甲酰基等硝基化芳香族化合物、靛兰类化合物、苯并醌类化合物、蒽醌类化合物、偶氮化合物、茚苯胺类化合物、或者二或三苯基甲烷类化合物；优选为：2,4‑二硝基苯酚(Dnp)、硝基苯基、硝基苄氧基羰基、或者硝基苯甲酰基。