[发明专利]基于适体和金磁纳米颗粒的细胞因子TNF-α的检测方法有效
申请号: | 201710271468.8 | 申请日: | 2017-04-24 |
公开(公告)号: | CN106918633B | 公开(公告)日: | 2019-06-25 |
发明(设计)人: | 缪鹏;唐玉国;陈锡峰;杨大威;郭振振 | 申请(专利权)人: | 中国科学院苏州生物医学工程技术研究所 |
主分类号: | G01N27/327 | 分类号: | G01N27/327 |
代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理事务所(普通合伙) 11369 | 代理人: | 韩飞 |
地址: | 215163 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本案涉及基于适体和金磁纳米颗粒的细胞因子TNF‑α的检测方法,包括:以磁性玻碳电极作为工作电极;将金修饰于Fe3O4纳米颗粒,制得金磁纳米颗粒;将DNA探针1修饰于金磁纳米颗粒表面;将DNA探针2与金磁纳米颗粒表面的DNA探针1进行杂交反应;将金磁纳米颗粒通过磁场作用吸附于玻碳电极表面;将磁性玻碳电极插入待测液中进行反应,并采集相应电化学响应值,根据电化学响应值与细胞因子TNF‑α浓度的对应关系,获得待测液中细胞因子TNF‑α的浓度。本案具有灵敏度高、快速、成本低的特点,可以实现TNF‑α生物传感的应用;通过引入金磁复合纳米材料,不仅可用于适体的固定,还可实现电极的循环使用。 | ||
搜索关键词: | 基于 纳米 颗粒 细胞因子 tnf 检测 方法 | ||
【主权项】:
1.一种用于非疾病诊断的基于适体和金磁纳米颗粒的细胞因子TNF‑α的检测方法,其特征在于,包括:1)以磁性玻碳电极作为工作电极,对磁性玻碳电极进行预处理;2)将金修饰于Fe3O4纳米颗粒,制得金磁纳米颗粒;3)将DNA探针1修饰于所述金磁纳米颗粒表面;4)将DNA探针2与所述金磁纳米颗粒表面的DNA探针1进行杂交反应,以在所述金磁纳米颗粒表面形成互补配对的DNA双链;5)将所述金磁纳米颗粒通过磁场作用吸附于所述磁性玻碳电极表面;6)将所述磁性玻碳电极插入待测液中进行反应,并采集相应电化学响应值,根据电化学响应值与细胞因子TNF‑α浓度的对应关系,获得待测液中细胞因子TNF‑α的浓度;其中,所述DNA探针1的序列为5’‑SH‑TTTTTTTTGTCGCCGACTGCGCCATC‑3’;所述DNA探针2的序列为5’‑MB‑TGGTGGATGGCGCAGTCGGCGACAA‑3’;其中,MB为电信号分子亚甲基蓝;所述DNA探针1的5’端修饰有巯基,以与所述金磁纳米颗粒表面发生共价键合,并组装DNA双链;所述DNA探针2的序列含有所述细胞因子TNF‑α的适体序列,以与待测样本中的所述细胞因子TNF‑α结合,以破坏所述DNA双链结构,使得所述DNA探针2游离,电极表面的所述亚甲基蓝数量大幅减少,从而获得的峰电流降低,通过分析降低值,实现对所述细胞因子TNF‑α的定量分析。
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