[发明专利]一种基于胚芽浸渍诱导板栗多倍体的方法

摘要

本发明属于果树育种技术领域，提供一种基于胚芽浸渍诱导板栗多倍体的方法，包括以下步骤：1)胚芽前处理，2)配制诱导药剂，3)诱导药剂浸渍胚芽，4)培育成苗，5)多倍体植株筛选。其中，所用诱导药剂为浓度0.1～1w/v％(优选0.5w/v％)的秋水仙素水溶液。本发明以板栗种子的胚芽为材料，在适宜的药剂浓度、胚根萌发长度(2.1～4.0cm)和药剂浸渍胚芽时长(48～84h，优选72h)等因素条件下，创建了一种基于胚芽浸渍诱导板栗多倍体的方法，可诱导产生大比率板栗多倍体植株，为今后提供一种切实可行的板栗多倍体诱导方法，从而为板栗倍性育种的成功提供技术支撑。

主权项

1.一种基于胚芽浸渍诱导板栗多倍体方法，其特征在于，包括以下步骤：1)胚芽前处理，2)配制诱导药剂，3)诱导药剂浸渍胚芽，4)培育成苗，5)多倍体植株筛选；其中，步骤2)配制的诱导药剂为浓度0.5％w/v的秋水仙素水溶液；所述多倍体包括四倍体和六倍体；步骤1)胚芽前处理：选择健康充实的板栗种子，用湿沙层积催芽板栗种子，直至种子胚根萌发至长度为2.1～4.0cm时取出，然后去除板栗种子内外种皮，横向切除子叶整体的1/3～1/2，露出子叶间隙，由此打开闭合的子叶，暴露出被子叶保护的胚芽，作为诱导处理材料；步骤3)诱导药剂浸渍胚芽：选择规格为直径10cm，高2cm的培养皿，底部均匀覆盖脱脂棉，并用镊子压实保持最终厚度，将暴露出胚芽的板栗种子，摆放在脱脂棉层上；用脱脂棉层包裹住板栗种子暴露出的胚芽至根尖部位；将配制好的诱导药剂倒入培养皿中，直到培养皿底部和包裹胚芽、胚根的脱脂棉呈饱和状态；在如此状态下使诱导药剂水溶液浸渍板栗种子胚芽72h；浸渍过程中培养皿盖不封死，保持空气流通。