[发明专利]一种白蚁头部感觉附肢的扫描电镜样品处理方法有效

专利信息
申请号: 201710230011.2 申请日: 2017-04-10
公开(公告)号: CN107014843B 公开(公告)日: 2019-07-16
发明(设计)人: 付丙鲜;张大羽;戎念杭 申请(专利权)人: 浙江农林大学
主分类号: G01N23/2202 分类号: G01N23/2202
代理公司: 杭州求是专利事务所有限公司 33200 代理人: 林超
地址: 311300 浙江省*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 发明公开了一种白蚁头部感觉附肢的扫描电镜样品处理方法。将白蚁放置于特制风洗装置中,风洗后投入特制辅助抽真空装置中,进行抽真空操作使白蚁下沉,先前固定再解剖,并先后在体视镜视野下和超声清洗仪中前漂洗,再进行后固定和后漂洗及逐级梯度脱水,接着放入特制滤纸筒中并封闭放入临界点干燥框进行临界点干燥,在体视镜下贴台粘样,对部分样品进一步解剖下目标组织、二次粘样,并将非二次粘样样品用导电银胶将样品非目标观察区域与粘样胶带进行连接,待银胶干燥后进行全方位喷金处理。本发明有效解决了样品表面污染、在固定液中难以下沉、样品皱缩变形以及样品组织不同部位相互遮挡、在电镜中观察时样品充放电等背景技术中提到的多方面技术问题,解决问题的成本低,具有较大的应用价值。
搜索关键词: 一种 白蚁 头部 感觉 扫描电镜 样品 处理 方法
【主权项】:
1.一种白蚁头部感觉附肢的扫描电镜样品处理方法,其特征在于方法包括以下步骤:1)将白蚁放置于两面通风的特制风洗装置(1)中,用冷风源向特制风洗装置(1)吹风进行风洗以除去白蚁体表的浮沉和污秽;2)将经风洗的白蚁投入盛有醛类固定液的特制辅助抽真空装置(2)中,进行抽真空操作,使得白蚁下沉到电镜样品处理前固定液中;3)将已沉入前固定液中的白蚁置于4℃进行充分前固定,前固定结束后取出虫体在冰上进行解剖,然后将解剖后获得的目的组织放入0-4℃缓冲液中在体视镜视野中进行漂洗,漂洗至在体视镜视野下观察不到白蚁样品表面存有体内溢出物质;4)将漂洗后的样本放入0-4℃的缓冲液中,用超声清洗仪进行脱气清洗,期间更换新的缓冲液重复多次,直到将白蚁样品表面清洗干净;5)将白蚁样品进行后固定,再经后漂洗及逐级脱水处理后放入特制滤纸筒(3)中并封闭特制滤纸筒(3),再将特制滤纸筒(3)放入临界点干燥框中并与临界点干燥框内壁牢固紧贴,进行临界点干燥;6)放样前,滤纸筒(3)和临界点干燥框下部先用纯脱水剂浸润;7)在体视镜下对充分干燥后的白蚁样品进行贴台粘样,用解剖镊和解剖针解剖下样品的目标组织二次粘样;8)用精细解剖针蘸取导电银胶将非二次粘样样品的非目标观察区域与粘样胶带进行连接;9)待银胶干燥后,对白蚁样品及样品台进行偶数次对称喷金处理;所述的特制风洗装置(1)包括筒体(11)、筛网(12)和手柄(13),筒体(11)的两端端面均设置有筛网(12),筒体(11)侧面连接有用于手握的手柄(13);所述的特制辅助抽真空装置(2)包括锥形管(21)、管盖(22)、中空圆台(23)、透气耐水表面洁净平整的可折叠材料(24)、液面(25)和通孔(26),锥形管(21)从顶端到底端直径逐渐变小,锥形管(21)底端封闭,锥形管(21)顶端开口并连接有管盖(22),管盖(22)上开有用于抽真空的通孔(26),锥形管(21)内盛有电镜样品处理前固定液,白蚁或其头部感觉附肢置于前固定液;锥形管(21)内还置有两端开口的中空圆台(23),两端开口的中空圆台(23)底端覆有材料(24),材料(24)与前固定液的液面(25)相平齐接触;所述的特制滤纸筒(3)是由滤纸(31)通过折卷而成,滤纸(31)沿短边方向通过弯折或者卷曲成具有中空内腔的筒状结构,然后再两端向中间弯折使得中空内腔与外界不直接相通。
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