[发明专利]一种基于固相连接CRISPR/Cas9gRNA串联表达载体构建新技术在审
| 申请号： | 201710228205.9 | 申请日： | 2017-04-10 |
| 公开（公告）号： | CN107058385A | 公开（公告）日： | 2017-08-18 |
| 发明（设计）人： | 杨兴林;陈国泽;潘讴东 | 申请（专利权）人： | 和元生物技术（上海）股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/66;C12N15/11 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 201321 上海*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种基于固相连接的CRISPR/Cas9gRNA串联表达载体构建新技术,该技术使用链霉亲和素磁珠和biotin偶联的PCR起始片段、延伸片段和终止片段，通过精确设计的酶切位点，使每个片段能通过粘末端精确连接。经过酶切，清洗，连接的步骤的循环而将多个片段在短时间内高效连接多个gRNA表达载体构建技术。该技术能够将构建周期从15‑20天缩短到1天内完成，极大地节约成本和时间。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 基于 相连 crispr cas9grna 串联 表达 载体 构建 新技术 | ||
【主权项】：
一种基于固相连接CRISPR/Cas9gRNA串联表达载体构建新技术, 其特征在于：使用链霉亲和素磁珠和biotin偶联的PCR起始片段、延伸片段和终止片段，通过精确设计的酶切位点，使每个片段能通过粘末端精确连接；经过酶切，清洗，连接的步骤的循环而将多个片段在短时间内高效连接多个gRNA表达载体构建技术。
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