[发明专利]基于荧光染料ThT、RET基因的温度计的构建方法有效

专利信息
申请号: 201710159912.7 申请日: 2017-03-17
公开(公告)号: CN107044888B 公开(公告)日: 2019-03-01
发明(设计)人: 王明茹;高如如;石硕 申请(专利权)人: 同济大学
主分类号: G01K11/16 分类号: G01K11/16
代理公司: 上海东亚专利商标代理有限公司 31208 代理人: 董梅
地址: 200092 *** 国省代码: 上海;31
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摘要: 发明涉及一种基于RET基因构象变化引起荧光染料硫黄素T荧光强度变化的温度计的构建,具体为:将荧光染料硫黄素T(ThT)和RET按1:1的摩尔比混合,加入Tris‑HCl缓冲溶液,调整pH=7,8和9。本发明构建的体系对pH和温度有明显响应,尤其在pH为7、8、9时,随温度升高,ThT的荧光强度有规律的下降,据此可设计成温度计。因为人体内pH在7左右,所以针对pH=7,在25‑40℃之间,设计成“体温计”。
搜索关键词: 基于 荧光 染料 tht ret 基因 温度计 构建 方法
【主权项】:
1.一种基于荧光染料ThT、RET基因的温度计的构建方法,按下述步骤:第一,荧光染料ThT和RET基因摩尔比为1:1,在Tris‑HCl缓冲溶液中培养形成体系,通过改变Tris‑HCl缓冲溶液的pH值,分别控制体系的pH值为7、8和9;第二,在温度4‑55℃范围内,每间隔3℃恒温培养30分钟;第三,检测荧光,参数设置为狭缝10nm,电压500V,获得各温度梯度荧光强度参数。
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