[发明专利]转基因作物中PAT基因的LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法在审
申请号: | 201710143439.3 | 申请日: | 2017-03-11 |
公开(公告)号: | CN106755545A | 公开(公告)日: | 2017-05-31 |
发明(设计)人: | 李飞武;牛铭晨;闫伟;龙丽坤;李葱葱;邢珍娟;董立明;刘娜 | 申请(专利权)人: | 吉林省农业科学院 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12N15/11 |
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地址: | 130033 吉林省*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | 本发明公开了一种转基因作物中PAT基因的LAMP检测引物组、试剂盒及检测方法。引物组由6条特异性引物组成,其核苷酸序列如SEQ ID NO1~6所示。检测试剂盒包括检测引物溶液、具有链置换活性的DNA聚合酶、10×LAMP反应缓冲液、dNTPs溶液、显色剂。检测方法是利用LAMP检测引物组及具有链置换活性的Bst DNA聚合酶,在60~65℃对样品DNA模板进行扩增,然后加入显色剂并观察反应液颜色变化,从而判断样品是否含有PAT基因成分。本发明不需要特殊仪器,具有快速高效、操作简便、特异性强等特点,适合现场检测。 | ||
搜索关键词: | 转基因 作物 pat 基因 lamp 检测 引物 试剂盒 方法 | ||
【主权项】:
一套转基因作物中PAT基因的LAMP检测引物组,其特征在于,所述引物包括外引物PAT‑F3、外引物PAT‑B3、内引物PAT‑FIP、内引物PAT‑BIP、环引物PAT‑LF和环引物PAT‑LB,其核苷酸序列分别如下所示:外引物PAT‑F3:GGCGCAAGGTTTTAAGTCTG(SEQ ID NO:1);外引物PAT‑B3:GGTAACTGGCCTAACTGGC(SEQ ID NO:2);内引物PAT‑FIP:TACCCCGGGCTGTGTATCCCATAGGCCTTCCAAACGATCC(SEQ ID NO:3);内引物PAT‑BIP:ATTGCGCGCAGCTGGATACAAGGAGGAGCTGGCAACTCA(SEQ ID NO:4);环引物PAT‑LF:GCCTCATGCAACCTAACAGAT(SEQ ID NO:5);环引物PAT‑LB:GCATGGTGGATGGCATGAT(SEQ ID NO:6)。
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