[发明专利]一种用于净化和检测氨基甲酸酯和有机磷农药的亲和磁性微球、及其制备和使用方法

摘要

本发明公开了一种用于净化和检测氨基甲酸酯和有机磷农药的亲和磁性微球、及其制备和使用方法，该亲和磁性微球在多孔或中空微球内部聚合有磁性离子，在多孔或中空微球的表面包覆有乙酰胆碱脂酶或抗氨基甲酸酯和有机磷类农药抗体；其制备方法包括乙酰胆碱酯酶在磁性微球表面固定及磁性微球的表面封闭。本发明能够有效的提取样本中的氨基甲酸酯和有机磷类农药，以解决现有技术中的复杂基质带来的假阳性/假阴性的结果，提高实际样本中农药现场残留检测的准确性和可靠性。

主权项

一种用于净化和检测氨基甲酸酯和有机磷类农药的亲和磁性微球的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：A、乙酰胆碱酯酶在磁性微球表面固定取磁性微粒悬液加入到离心管中，轻摇重悬；置于磁性分离器上，磁性分离，弃上清；加入偶联缓冲液，轻摇重悬；将离心管置于磁性分离器上，磁性分离，弃上清后备用；取乙酰胆碱酯酶配制得到备用溶液，取适量加入磁性微粒中，使磁性微粒和乙酰胆碱酯酶或抗氨基甲酸酯和有机磷类农药抗体反应浓度为0.1～10mg/ml使得其达到最大偶联率；反应完毕，磁性分离，弃上清；加入清洗缓冲液，轻摇重悬磁粒；磁性分离，弃上清，除去非特异性吸附在磁性微粒表面的酶，得到亲和磁性微球粗品；B、磁性微球的表面封闭在步骤A得到的亲和磁性微粒粗品中加入封闭剂，封闭磁性微粒粗品上未与酶结合的位点；用清洗缓冲液多次清洗，最后悬于保存缓冲液中，2～8℃保存，即制得亲和磁性微球。