[发明专利]一种人类精子线粒体功能检测方法

摘要

本发明公开了一种人类精子线粒体功能检测的方法，特点是步骤为：(1)将液化的精液用37℃缓冲液稀释，每个标本处理两管，分别作为对照管和检测管；(2)将500μL稀释过的精子加入到流式细胞仪上样管中，同时加入5μL的JC‑1染液，避光染色15分钟，其中对照管置于85℃条件下2分钟，灭活，检测管置于37℃条件下保持活力；(3)设定流式细胞仪的校准，对照管、检测管按顺序上机，每管样本至少连续测定两次，每管样本至少记录5000个细胞并使用MMP软件统计分析；(4)结果判断依据现已有大量临床数据计算出的正常人范围值设定；该方法优点是操作简单、结果易于判定、检测结果准确、稳定可靠、重复性好、且易于临床推广。

主权项

一种人类精子线粒体功能检测方法，其特征在于包括如下步骤：(1)将液化的精液用37℃缓冲液稀释精子至1～2×106个/mL，每个标本处理两管，分别作为对照管和检测管；(2)将500μL稀释过的精子加入到流式细胞仪上样管中，同时加入5μL的JC‑1染液，避光染色15分钟，其中对照管置于85℃条件下2分钟，灭活，检测管置于37℃条件下保持活力；(3)设定流式细胞仪的校准，对照管、检测管按顺序上机，每管样本至少连续测定两次，每管样本至少记录样本主群5000个细胞并使用MMP软件统计分析；(4)根据MMP软件统计分析得出结果，将37℃正常处理样本百分比减去85℃高温处理后的空白样本百分比，得到的MMP百分比差值即区分出正常人群百分比数值；(5)测定后，分别用漂白剂、进样管清洁剂和除菌的双蒸水彻底清除残留于流式细胞仪进样线中的细胞碎片和荧光染料。