[发明专利]一种人二倍体细胞微载体培养有效传代的方法有效
申请号: | 201710112043.2 | 申请日: | 2017-02-28 |
公开(公告)号: | CN106754651B | 公开(公告)日: | 2020-05-12 |
发明(设计)人: | 姜云水;李剑波;包佳源;王平;唐彩华;顾春燕;张峰;吴洁;毛子安;庄昉成;毛江森 | 申请(专利权)人: | 浙江普康生物技术股份有限公司 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 高丽敏;韩介梅 |
地址: | 310053 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明涉及生物技术领域,特别是用于人二倍体细胞在生物反应器微载体放大培养过程中的有效传代的方法。该方法用微载体培养人二倍体细胞种子,在种子培养体系中预平衡空白微载体,用含柠檬酸钠的胰酶消化液消化种子细胞,在种子反应器中温和地间歇搅拌培养3‑6小时,再转移至扩增反应器中扩增培养,得到人二倍体细胞微载体放大培养过程中有效的传代。本发明具有提高传代过程中细胞的活力、粘附率和粘附均匀度,使传代效率明显提高,解决了人二倍体细胞在生物反应器和微载体上放大培养困难的问题。 | ||
搜索关键词: | 一种 二倍 体细胞 载体 培养 有效 传代 方法 | ||
【主权项】:
一种人二倍体细胞微载体培养有效传代的方法,其特征在于用人二倍体细胞MRC‑5或KMB17细胞,微载体为cytodex 1,用微载体培养人二倍体细胞种子,当种子反应器中微载体上培养的人二倍体细胞长至汇合度80%以上时,将预处理好的空白微载体加入到种子反应器中与细胞种子培养物共同培养6小时以上或过夜,用含柠檬酸钠的胰酶消化液消化微载体上的种子细胞,加入完全培养基中和后在种子反应器中温和地间歇搅拌,起始培养3‑6小时,再将起始培养物从种子反应器转移至扩增反应器中进行扩增培养,得到人二倍体细胞微载体放大培养过程中有效的传代。
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