[发明专利]一种检测人乳头状瘤病毒的PCR试剂盒及其制备方法

摘要

检测人乳头状瘤病毒的PCR试剂盒使用了含有TaqMan探针的多重实时荧光PCR技术。在PCR反应中，引入了一个5’末端连接荧光报告染料，3’末端连接荧光淬灭分子的DNA探针；当在PCR延伸扩增中，体系中的Taq酶切断探针分子，使得与淬灭分子分离后的报告染料分子发出荧光；本发明的有益效果在于检测准确度高而且可以定量检测，重复性好。本发明是一种能在早期快速、简便、有效的检测临床最常见的13种属于高危以及高危亚型但中国人不常见的HPV病毒的多重实时荧光定量PCR检测方法。本发明为体外诊断试剂，不含任何有害成分，与受检者无直接接触，安全可靠。

主权项

检测人乳头状瘤病毒的PCR试剂盒，包括以下各组分：特异性引物，特异性Taqman探针，Taq酶，PCR反应液,阳性参考品，阴性参考品，核酸萃取液，其特征在于：所述的PCR反应液分四管，每管采用了四重TaqMan探针实时荧光PCR技术，对宫颈脱落细胞中的13种人乳头状瘤病毒基因组DNA的特异性核酸序列扩增并分型检测，所述的四管PCR反应液分别为：101‑I用于4种中国人常见高危HPV‑16、18、58、2亚型的分型和定量测定，101‑II用于对中国人较常见的3种高危HPV‑39、31、35亚型的分型和定量测定，101‑III和101‑IV用于中国人不常见的6种HPV‑68、45、59、56、51、33高危HPV亚型的分型和定量测定以及作为内参的人类正常基因。