[发明专利]一种利用生物柴油副产物粗甘油进行高附加值转化获得SA的方法

摘要

本发明公开了一种利用生物柴油副产物粗甘油进行高附加值转化获得SA的方法，其特征在于以生物柴油副产物粗甘油、含铵根离子的氮源和餐厨废水等为发酵底物，利用大肠杆菌基因工程菌进行发酵，发酵过程中进行碳源和氮源的补加，获得N‑乙酰神经氨酸含量可达5～10g/L。本发明为生物柴油副产物粗甘油的高附加转化提供一条新的途径。

主权项

一种利用生物柴油副产物粗甘油进行高附加值转化获得SA的方法，其特征在于，包括如下步骤：a、副产物粗甘油的预处理：将制备得到的生物柴油粗品静止分层，上层为柴油、下层为副产物粗甘油；首先将粗甘油与蒸馏水按体积比1:2～4混匀，以降低粗甘油的粘性；然后用酸调节pH至3～5，使粗甘油中的皂化物转变为游离脂肪酸，静置分层，使游离脂肪酸从粗甘油中分离出来；再对粗甘油进行40～80℃真空蒸发，除去易挥发性杂质；最后再加入活性炭进行吸附脱色并除杂；b、发酵培养基的配置：以预处理后的粗甘油作为碳源，加入含铵根离子的氮源，再加入餐厨废水，使碳源和氮源的质量比为1:1～3:1、甘油含量在10～30g/L；再加入IPTG，使IPTG的质量浓度在1～3％；最后调pH至7.0、高温灭菌，获得发酵培养基；c、种子液制备：首先将活化大肠杆菌基因工程菌接种到LB固体培养基上，培养6～12h；然后再接种到LB液体培养基上，继续培养6～12h，得到二级种子液；d、发酵：将二级种子液按照3％～15％的接种量接种到5L步骤b获得的发酵培养基中，溶氧保持在20％以上，搅拌，维持发酵温度为35～40℃，进行连续发酵；e、待底料耗完后，开始补料，保持pH在6.0～7.0，继续培养60～80h，发酵结束，得产物。