[发明专利]一种香茅草组培快繁的方法

摘要

本发明公开了一种香茅草组培快繁的方法，包括外植体选择及处理、初代诱导、继代培养、生根培养基及炼苗移栽工序；修剪健壮的香茅草作为外植体，对外植体进行灭菌消毒处理后接种于初代诱导培养基中获取初始芽，再将初始芽接种于继代培养基中经过15～20天继代培养，形成丛生芽，将高≥3cm单芽剪掉上部叶片后转入生根培养基中诱导生根，最后进行炼苗移栽获得香茅草成活苗。本发明通过对香茅草外植体消毒，初代诱导，继代培养，生根培养等各项因素及培养方式的筛选，并采用适宜的炼苗、育苗措施，建立了香茅草组培快繁技术体系，种苗性状稳定，为香茅草组培工厂化育苗提供了技术支撑，对于推动香茅草产业的发展具有重要意义。

主权项

1.一种香茅草组培快繁的方法，其特征在于：包括外植体选择及处理、初代诱导、继代培养、生根培养基及炼苗移栽工序；修剪健壮的香茅草作为外植体，对外植体进行灭菌消毒处理后接种于初代诱导培养基中获取初始芽，再将初始芽接种于继代培养基中经过15～20天继代培养，形成丛生芽，将高≥3cm单芽剪掉上部叶片后转入生根培养基中诱导生根，最后进行炼苗移栽获得香茅草成活苗；主要操作步骤如下：(1)外植体选择及处理：于晴天选择健壮的香茅草，剪去下部残留根系及上部叶片，保留茎及部分叶鞘，剥掉外面1～3层叶鞘后作为外植体材料；用清水冲洗掉外植体表面泥土后放入去磷洗涤剂溶液中浸泡2min，同时用软毛刷刷洗外植体，然后用自来水冲洗干净；在超净工作台上，将外植体放入体积浓度75％的酒精溶液中浸泡10s后，用无菌水冲洗3～5次，再将其放入体积浓度0.1％HgCl2溶液中浸泡8min～12min，用无菌水冲洗3次～5次；(2)初代诱导：用手术刀将步骤(1)得到的外植体剥掉1～2层叶鞘后垂直插入初代诱导培养基中，立稳；(3)继代培养：待接入初代诱导培养基中的茎段生长至5cm以上时，剪切掉上部叶片，保持初始芽芽体高度为2.5～3.5cm，将修剪后的初始芽转入继代培养基中，经过15～20天培养，增殖形成丛芽，增殖系数3.0～5.0；在超净台上，将增殖芽分株为单芽或小丛，对单芽或小丛继续进行继代培养；(4)生根培养：将步骤(3)得到的高≥3cm单芽剪掉上部叶片，保持单芽芽体高度1.5～2.5cm，将修剪后的单芽转入生根培养基中，7～10天后，即可长根；(5)炼苗移栽：待步骤(4)生根培养后的单芽根系长度达到1.0cm以上时移到室外育苗网室进行炼苗，3～7d后打开培养瓶盖，将生根培养基及组培苗倒出，轻轻挤压生根培养基，取出已经锻炼的生根苗，放入清水中震荡洗除残留药液；用木棍或其它工具在装有育苗基质的育苗容器中心钻孔，将生根苗放入孔中，捏紧育苗容器，淋透水，之后进行苗木管理；步骤(1)所述的外植体材料保留茎的长度为2.5cm～3cm；步骤(2)所述的初代诱导培养基的配方为：WPM+BA 0.3mg/L～1.0mg/L+白糖30g/L+琼脂4.5g/L，pH＝5.8；步骤(3)所述的继代培养基配方为：WPM+BA 2.0mg/L～3.0mg/L+NAA 0.2mg/L～0.5mg/L+白糖3％+琼脂5.5g/L，pH＝5.8；步骤(4)所述的生根培养基配方为：1/2WPM+IBA 0.8mg/L～1.0mg/L+IAA1.2mg/L～1.5mg/L+白糖1.5％+琼脂6.0g/L，pH＝5.8；步骤(5)所述的育苗基质为椰糠；步骤(2)所述的初代诱导、步骤(3)所述的继代培养、步骤(4)所述的生根培养的培育控制条件均为：温度为25±3℃，光照强度2000Lx～8000Lx，光照时间12h/d～16h/d。