[发明专利]基于铂纳米颗粒催化H2

摘要

本发明公开了一种基于铂纳米颗粒催化H2O2分解产生气压变化即时检测端粒酶活性的方法，当存在活性端粒酶时，磁珠表面修饰的端粒酶引物会与端粒酶结合，使得端粒酶引物沿着其3’末端被延长，并形成一条带有TTAGGG重复序列的DNA单链，这条长的DNA单链能够与许多cDNA杂交，通过将cDNA修饰到铂纳米颗粒表面，就使得铂纳米颗粒固定到了磁珠的表面，然后利用铂纳米颗粒催化过氧化氢分解产生氧气，体系气压发生变化，再采用便携式气压计检测体系的气压值，即可实现对端粒酶活性的即时检测。本发明检测方法简单、快速、灵敏，可以检测不同种类肿瘤细胞中端粒酶活性的表达水平，在以端粒酶为靶点的癌症的治疗诊断方面具有重要的意义。

主权项

一种基于铂纳米颗粒催化H2O2分解产生气压变化即时检测端粒酶活性的方法，其特征在于它由下述步骤组成：(1)将氨基化的磁珠与醛基化的端粒酶引物反应，制备磁珠/端粒酶引物复合物；(2)将铂纳米颗粒与巯基化的cDNA探针反应，制备铂/cDNA复合物；(3)将待测细胞进行裂解提取端粒酶，以提取的端粒酶RNA为模板，对磁珠/端粒酶引物复合物进行扩增；(4)将步骤(3)的扩增产物和磁珠/端粒酶引物复合物分别与铂/cDNA复合物进行杂交；(5)在常温、密闭条件下，将步骤(4)的两个杂交产物分别与双氧水进行反应，反应完后，分别检测两个反应体系的气压，若步骤(3)的扩增产物对应体系的气压大于磁珠/端粒酶引物复合物对应体系的气压，说明待测细胞有活性端粒酶，否则，待测细胞无活性端粒酶。