[发明专利]一种西瓜果斑病菌巢式PCR检测方法有效
申请号: | 201611249322.5 | 申请日: | 2016-12-29 |
公开(公告)号: | CN106480227B | 公开(公告)日: | 2019-07-19 |
发明(设计)人: | 刘裴清;李本金;丁雪玲;翁启勇;王荣波;陈庆河 | 申请(专利权)人: | 福建省农业科学院植物保护研究所 |
主分类号: | C12Q1/6848 | 分类号: | C12Q1/6848;C12Q1/689;C12Q1/04;C12N15/11 |
代理公司: | 福州元创专利商标代理有限公司 35100 | 代理人: | 蔡学俊;陈彩芳 |
地址: | 350013 福建省福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | 本发明提供一种西瓜果斑病菌巢式PCR检测方法。本方法通过设计西瓜果斑病菌VapB特异性引物,以样品DNA为模板,利用上述通用引物进行第一轮PCR扩增,再以第一轮PCR产物为模板,利用两对西瓜果斑病菌特异性引物VapB‑1F/VapB‑1R和VapB‑1F/VapB‑2R进行第二轮PCR扩增,扩增产物进行电泳检测,如果出现175bp的特异条带,则确定所检测的病原菌为西瓜果斑病菌。本发明克服了生物学鉴定、酶联免疫技术和常规PCR等方法的缺点,提供了特异性快速、灵敏、特异的西瓜果斑病菌检测方法,可用于西瓜果斑病菌的早期诊断,对该病害的预防和及时防治具有十分重要的意义。 | ||
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【主权项】:
1.一种西瓜果斑病菌巢式PCR检测引物,其特征在于:所述的检测引物包括如下:VapB‑1F:5’‑GGGCAATAGCTTGGCGGTTCG‑3’; VapB ‑1R:5’‑CATTGGCCTCGTCCCGGTTGA‑3’;VapB‑2F:5’‑GCGAACGTAGTCGAAGCGCTCG‑3’;VapB‑2R:5’‑TGGCCTCGTCCCGGTTGAACT‑3’。
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