[发明专利]一种免疫磁珠法分离胎盘滋养层细胞的方法在审
| 申请号： | 201611187878.6 | 申请日： | 2016-12-20 |
| 公开（公告）号： | CN107312747A | 公开（公告）日： | 2017-11-03 |
| 发明（设计）人： | 王臣;罗海贝;吴烈华 | 申请（专利权）人： | 华东医药（杭州）基因科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/073 | 分类号： | C12N5/073 |
| 代理公司： | 无锡市汇诚永信专利代理事务所(普通合伙)32260 | 代理人： | 张欢勇 |
| 地址： | 310051 浙江省杭州市江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 本发明公开了一种免疫磁珠法分离胎盘滋养层细胞的方法，包括以下步骤(1)免疫磁珠偶联特异性抗体的制备，向免疫磁珠中加偶联剂和能够特异性捕获胎盘滋养层细胞的抗体进行孵育；(2)洗涤(1)中偶联抗体的免疫磁珠2次，后保存在保存液中备用；(3)收集胎盘滋养层样本，采用酶解法制备为样本细胞悬液；(4)把(3)中的样本细胞悬液洗涤2次；(5)加入(2)中的偶联抗体的免疫磁珠进行孵育；(6)洗涤孵育完成的(5)中的免疫磁珠2次，弃上清，即可得到纯化的胎盘滋养层细胞，采用免疫磁珠法细胞分选技术，利用抗体偶联磁珠实现对胎盘滋养层细胞的特异性捕获，简单几步便能轻松、快速的实现滋养层细胞的分离，且易于实现自动化。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 免疫 磁珠法 分离 胎盘 滋养 细胞 方法 | ||
【主权项】：
一种免疫磁珠法分离胎盘滋养层细胞的方法，其特征在于，所述方法通过以下步骤实现：(1)免疫磁珠偶联特异性抗体的制备，向免疫磁珠中加偶联剂和能够特异性捕获胎盘滋养层细胞的抗体并37℃偶联16‑24h；(2)洗涤(1)步骤中孵育完成的偶联抗体的免疫磁珠，将偶联抗体的免疫磁珠保存在保存液中备用；(3)收集胎盘滋养层样本，将该样本制备为样本细胞悬液；(4)把(3)步骤中的样本细胞悬液洗涤；(5)向(4)步骤洗涤后的样本细胞悬液中加入(2)步骤中的偶联有特异性抗体的免疫磁珠进行孵育，孵育条件为4℃‑42℃，30min‑24h；(6)洗涤孵育完成的(5)步骤中的免疫磁珠，弃上清，即可得到纯化的胎盘滋养层细胞；所述免疫磁珠为羧基磁珠、环氧基磁珠、甲苯磺酰基磁珠或甲苯磺酰基磁珠，能够特异性捕获胎盘滋养层细胞的抗体为HLA‑G抗体，所述步骤(3)的胎盘滋养层样本为5‑8周孕妇宫颈脱落细胞，且样本为25‑500μl，其中包含胎儿滋养层细胞和母体细胞，所述洗涤液均为细胞培养用PBS，PBS构成组分为1.35M NaCl，47mM KCl，100mM Na2HPO4，20mM NaH2PO4，且PBS的pH值为7.4。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于华东医药（杭州）基因科技有限公司，未经华东医药（杭州）基因科技有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201611187878.6/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：一种振动抛光机
- 下一篇：一种汽车发动机异形件圆弧面抛光用夹具
