[发明专利]一种纯化猪肺炎支原体的方法

摘要

本发明提供了一种纯化猪肺炎支原体的方法，该技术方案以抗原培养液直接作为原料，先后经澄清处理、超滤浓缩、洗滤三步处理即告完成，在此基础上基于实验手段设计了所采用的工艺装置，利用中空纤维膜剪切力低、容尘量高的特点，并优化了操作条件，通过跨膜压、剪切速率的限定保证了抗原自身稳定，并确保了杂质去除率。应用本方法纯化猪肺炎支原体抗原，不进行浓缩的情况下，抗原回收率达到87.8％以上，抗原液中猪血清去除60.7％；5倍浓缩后杂蛋白去除率达98％，抗原回收率62％，猪血清含量与原抗原液相比降低90.3％。同时，由于本方法处理量大、处理速度快、操作简单、工艺稳定，因此可以实现自动化或半自动化生产。

主权项

1.一种纯化猪肺炎支原体抗原的方法，其特征在于包括以下步骤：1)取猪肺炎支原体抗原培养液，澄清处理，收集产物即为澄清抗原液；2)应用300KD的中空纤维系统对澄清抗原液进行浓缩纯化，剪切力控制在4000sec^‑1，跨膜压TMP控制在5‑l0psi，将抗原液浓缩至澄清抗原液体积的1/5，弃透过液，保留截留液；3)用无菌的PH7.2的PBS将上述抗原浓缩液两倍稀释，剪切力控制在4000sec^‑1，跨膜压TMP控制在5‑l0psi，浓缩至上述抗原浓缩液的体积，弃透过液，保留截留液；4)用无菌的PH7.2的PBS将上述抗原浓缩液两倍稀释，剪切力控制在4000sec^‑1，跨膜压TMP控制在5‑l0psi，浓缩至上述抗原浓缩液的体积，弃透过液，保留截留液；5)用无菌的PH7.2的PBS将上述抗原浓缩液两倍稀释，剪切力控制在4000sec^‑1，跨膜压TMP控制在5‑l0psi，浓缩至上述抗原浓缩液的体积，弃透过液，收获截留液即为纯化浓缩的猪肺炎支原体抗原。