[发明专利]一种采用分光光度法测定虾青素的含量的方法

摘要

本发明公开了一种分光光度法测定虾青素的含量的方法，结果显示，采用经氢醌处理的三氯甲烷做为提取溶液，在489 nm 波长下测定吸光度，该分光光度法的标准曲线回归系数是0.9999，相对标准偏差为 0.36%，加标回收率99.8%~102.5%，表明该分析方法准确性高、重复性好，且简便、快速，可以作为企业大批量生产中虾青素的测定方法。

主权项

1.分光光度法测定虾青素的含量的方法，其特征在于虾青素是由四个异戊二烯单位以共轭双键形式链接，两端又有两个异戊二烯单位组成六节环结构的化合物，虾青素分子结构中的这种共轭双键体系及离域化的π电子，在可见光区表现出强吸收带，且每种类胡萝卜素分子的最大吸收峰位置与紫外可见光光谱的精细结构都是具有特征性的；由于类胡萝卜素分子的这种光吸收性质， 溶液中的类胡萝卜素一般服从 beer‑lambert定律，所以通过分光光度法可以实现对虾青素精确的定量分析；准确称取虾青素样品 40mg（准确至0.0002g），置于250mL的棕色容量瓶， 加入10mg BHT，加入50mL 二氯甲烷溶解，在热水浴中超声5 min，流水冷却至室温；再加入100mL 三氯甲烷继续超声5min溶解，冷却至室温，然后用三氯甲烷稀释至刻度，摇匀，即为待测溶液；准确移取待测溶液 A 1.0mL于 50mL 棕色容量瓶中，用处理过的三氯甲烷（三氯甲烷加0.02%氢醌振摇后过滤）稀释至刻度，摇匀得溶液B；准确移取试验溶液1.0mL 于50mL 棕色容量瓶中，用处理后的三氯甲烷稀释至刻度，摇匀；用紫外‑可见光分光光度计测定溶液 B 在波长489nm处的吸光度（1cm 石英比色皿）； 以处理后的三氯甲烷为空白对照；计算：式中：x——样品中虾青素百分含量；A489——样品溶液在 489 nm 处测得的吸光度；M——称取样品的质量，g；12500——样品的稀释倍数；1975——虾青素的百分吸收系数（E1cm=1%）。