[发明专利]一种采用分光光度法测定虾青素的含量的方法

说明书

本发明公开了一种分光光度法测定虾青素的含量的方法，结果显示，采用经氢醌处理的三氯甲烷做为提取溶液，在489 nm 波长下测定吸光度，该分光光度法的标准曲线回归系数是0.9999，相对标准偏差为 0.36%，加标回收率99.8%~102.5%，表明该分析方法准确性高、重复性好，且简便、快速，可以作为企业大批量生产中虾青素的测定方法。

技术领域

本发明属于饲料添加剂检验领域。具体涉及虾青素含量的测定方法。

背景技术

虾青素是一种广泛存在于生物体的非维生素A 源类胡萝卜素。在水生动物虾、

蟹、鱼和鸟类的羽毛中发挥调节色素沉积并显色的作用。虾青素被广泛应用于鱼虾等水产养殖动物的饲料添加剂，以补充人体内虾青素的缺乏。虾青素是类胡萝卜素合成的最高级别产物，具有明显的抗氧化、消除活性单线态氧的作用。 因此在食品、化妆品、保健品领域也有着广泛的应用前景。

从动植物及菌类中提取的虾青素，由于其虾青素含量较低及检测限值低的原因，

基本采用液相色谱分析法。 而目前市场上鱼饲料中的虾青素90%是化学合成得到， 国内尚未见有系统的对化工合成的虾青素含量检测的研究报道。 本文研究

参考国外对虾青素理化性质的报道，采用紫外分光光度法对化学合成虾青素的含量进行检测，结果满意可行。

发明内容

本文采用分光光度法测定虾青素的含量的方法，与离子色谱法相比，其操作简捷且结果准确，仪器易普及，适合在各饲料企业推广使用。

本发明包括以下步骤：

（1）样品预处理

准确称取虾青素样品40mg（准确至0.0002 g），置于250mL的棕色容量瓶，加入10mgBHT，加入50mL二氯甲烷溶解，在热水浴中超声5min，流水冷却至室温； 再加入100mL三氯甲烷继续超声5min 溶解，冷却至室温，然后用三氯甲烷稀释至刻度，摇匀，即为待测溶液。准确移取待测溶液A 1.0mL于50mL 棕色容量瓶中，用处理过的三氯甲烷（三氯甲烷加0.02%氢醌振摇后过滤）稀释至刻度，摇匀得溶液B。准确移取试验溶液 1.0mL于50mL棕色容量瓶中，用处理后的三氯甲烷稀释至刻度，摇匀。

（2）样品测定

用紫外—可见光分光光度计测定溶液 B 在波长489nm 处的吸光度（1 cm石英比色皿）。以处理后的三氯甲烷为空白对照。

计算：

式中：x——样品中虾青素百分含量；A₄₈₉——样品溶液在 489 nm 处测得的吸光度；M——称取样品的质量，g；12500——样品的稀释倍数；1975——虾青素的百分吸收系数（E_1cm=1%）。

附图说明

图1 分光光度法的虾青素标准。

图2 虾青素标准溶液的吸收光谱图（三氯甲烷）。

具体实施方式

下面将详细说明本发明的具体实施方式：

1.仪器与试剂：

仪器：

UV8500双光束 紫外分光光度计（无锡科达仪器厂）；电子天平（赛多利斯科学仪器（北京）有限公司）；超声波清洗器（杭州科博仪器有限公司）；恒温水浴装置（金坛市科析仪器有限公司）；离心机；氮气吹干；石英比色皿。

试剂：