[发明专利]一种鲤疱疹病毒Ⅱ型夹心ELISA检测试剂盒及检测方法

摘要

本发明是一种鲤疱疹病毒Ⅱ型夹心ELISA检测试剂盒，该试剂盒的主要组成为：鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF90纯化单抗溶液；酶标ORF90多抗溶液；稀释液；TMB底物溶液；终止液；鲤疱疹病毒2型阳性对照；阴性对照；包被液；96孔酶标板。本发明还涉及一种检测方法。本发明试剂盒和方法可用于无临床症状的潜伏感染鱼病毒检测，并可进一步应用于鲤疱疹病毒Ⅱ型在鱼体内变化规律的研究，从而为该病毒的防控提供依据。本发明方法与鲫鱼、金鱼的其它常见病毒无非特异性反应，可以用于国内养殖场的疫病诊断和出入境鱼类检疫。

主权项

1.一种鲤疱疹病毒Ⅱ型夹心ELISA检测试剂盒，其特征在于，该试剂盒包括：鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF90纯化单抗溶液，1支100 μL，为鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF90纯化单抗溶于水制成的溶液，浓度为10‑20 mg/mL；酶标ORF90多抗溶液，1支100 μL，为酶标ORF90多抗溶于水制成的溶液，浓度为10‑20 mg/mL；稀释液，2瓶，每瓶50 mL，溶液为质量体积浓度为10 g/L的牛血清白蛋白的磷酸盐缓冲液；TMB底物溶液，1支，250 μL；为TMB的DMSO溶液，其质量体积浓度为6 mg/mL；终止液，浓度为2 M的硫酸溶液1瓶，20 mL；鲤疱疹病毒2型阳性对照1支，500 μL，为金鱼阳性组织匀浆；阴性对照1支，500 μL，为阴性金鱼组织匀浆；包被液，1瓶，20 mL，为含有0.015 M 碳酸钠和0.035 M 碳酸氢钠的水溶液；96孔酶标板，1块；所述的磷酸盐缓冲液的重量体积比组成为：氯化钠                         8.0 g磷酸二氢钾                     0.2 g十二水合磷酸氢二钠             2.9 g氯化钾                         0.2g吐温‑80                        0.5 mL双蒸水                         1000 mL；该试剂盒中还包括：磷酸盐缓冲液PBST，1瓶50 mL，其质量体积比组成为：氯化钠                         8.0 g磷酸二氢钾                     0.2 g十二水合磷酸氢二钠             2.9 g氯化钾                         0.2 g吐温‑80                        0.5 mL双蒸水                         1000 mL；该试剂盒还包括：过氧化脲溶液，1瓶100 mL，由过氧化脲与乙酸钠‑柠檬酸缓冲液混合制成；其中，乙酸钠‑柠檬酸缓冲溶液的制法是：将17 mL质量体积浓度为94 g/L的柠檬酸溶液加入到500 mL质量体积浓度为81 g/L的乙酸钠溶液中，混合均匀制得；过氧化脲溶液的制法如下：称取140 mg过氧化脲，并将其加入到100 mL乙酸钠‑柠檬酸缓冲液。