[发明专利]双功能介孔硅球复合靶向给药系统的制备方法

摘要

本发明涉及一种双功能介孔硅球复合靶向给药系统的制备方法，属于纳米生物医学领域。采用共沉淀法制得超顺磁Fe₃O₄纳米粒，再以十六烷基三甲基溴化铵为模板，掺杂光敏剂，从而在磁性纳米粒和光敏剂表面包裹一层介孔二氧化硅并共价连接和物理吸附抗癌药物，最后用叶酸和透明质酸进行表面修饰，得到了双功能介孔硅球复合靶向纳米给药系统。本发明集核磁造影、荧光成像、磁热疗、光动疗、化疗多重功效，实现诊疗一体化，且其磁靶向及FA/HA双受体介导靶向作用能更有效地增强药物与肿瘤细胞的靶向结合，提高药物在肿瘤部位的有效浓度，增效减毒，双载药加强对肿瘤细胞的杀伤力，显著提高对肿瘤的治疗效果。本发明方法获得的产品在药物控制释放领域有很大的应用前景。

主权项

1.双功能介孔硅球复合靶向给药系统的制备方法，其特征在于具体步骤如下：1)掺杂超顺磁Fe₃O₄纳米粒和光敏剂的氨基化介孔硅球Fe₃O₄/PS@HMSNs‑NH₂的制备将超顺磁Fe₃O₄纳米粒分散于溶剂中，加入CTAB、氨水、光敏剂(PS)，搅拌溶解后依次缓慢滴加TEOS，继续避光反应；高速离心，洗涤，冻干即得Fe₃O₄/PS为核、二氧化硅为壳的核壳型双功能介孔硅球Fe₃O₄/PS@HMSNs；将其溶解后缓慢注入APTES(3‑氨丙基三乙氧基硅烷)，继续搅拌，离心，洗涤，真空干燥过夜，即得Fe₃O₄/PS@HMSNs‑NH₂；所述的超顺磁Fe₃O₄纳米粒的制备方法是：将FeCl₂·4H₂O、FeCl₃·6H₂O混合于去离子水中，于氮气保护下剧烈搅拌使之溶解，后迅速加入浓氨水，继续反应30‑60min后加入柠檬酸溶液，而后升温继续反应，冷却至室温用磁铁分离黑色磁性纳米粒，用去离子水、无水乙醇洗涤多次，冷冻干燥，得到在去离子水中分散性良好的透明超顺磁Fe₃O₄纳米粒；2)FA‑HA的制备i)将透明质酸HA溶于溶剂中，经N‑羟基琥珀酰亚胺NHS和N，N'‑二环己基碳二亚胺EDC活化后，再缓慢加入十八烷基胺的溶液，升温，于氮气保护下反应，离心，透析，冻干即得HA‑C₁₈；ii)将叶酸溶于溶剂中，经N‑羟基琥珀酰亚胺NHS和N，N'‑二环己基碳二亚胺DCC活化后加入HA‑C₁₈，反应得FA‑HA；3)Fe₃O₄/PS@HMSNs‑FA‑HA‑CLB/DOX的制备a)将苯丁酸氮芥CLB溶于溶剂中，经N‑羟基琥珀酰亚胺NHS和N，N'‑二环己基碳二亚胺DCC活化后偶联到步骤1)所得的Fe₃O₄/PS@HMSNs‑NH₂中，离心、过滤洗涤、干燥即得Fe₃O₄/PS@HMSNs‑CLB；再将其溶于溶剂中，加入阿霉素‑PBS缓冲液，搅拌过夜，离心，用PBS缓冲液洗涤，即得双载药Fe₃O₄/PS@HMSNs‑CLB/DOX；b)将步骤2)所得的FA‑HA溶于溶剂中，加入N‑羟基琥珀酰亚胺NHS和1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺EDC，搅拌；加入所得的Fe₃O₄/PS@HMSNs‑CLB/DOX的乙醇溶液，反应结束后反应液离心，透析，即得Fe₃O₄/PS@HMSNs‑FA‑HA‑CLB/DOX。