[发明专利]高效价粗品肝素钠的制备方法及其生产装置

摘要

本发明属于生物技术领域领域，具体涉及一种高效价粗品肝素钠的制备方法及其生产装置。本发明提供了一种用于制备粗品肝素钠的试剂组合物，所述试剂组合物包括以下试剂：低盐洗涤试剂A：质量体积百分比为2～5％的氯化钠水溶液；中盐洗涤试剂B：质量体积百分比为3～6％的氯化钠溶液；高盐洗涤试剂C：质量体积百分比为4～7％的氯化钠水溶液；洗脱试剂D：质量体积百分比为8～20％的氯化钠水溶液；沉淀试剂E：20～40°的肝素钠乙醇水溶液。本发明利用不同盐度的洗涤试剂进行梯度洗涤，结合低盐度洗脱和低乙醇度沉淀的制备方法制备的粗品肝素钠杂质低、肝素钠分子结构保存完整，生物活性接近或达到肝素钠注射级水平。

主权项

1.利用肝素钠的生产装置制备粗品肝素钠的方法，其特征在于，所述生产装置包括反应罐(1)，吸附罐(2)，离子交换柱(3)，试剂配制罐(4)和沉淀罐(5)，所述反应罐(1)，吸附罐(2)，离子交换柱(3)和沉淀罐(5)从上至下顺序布置，所述反应罐(1)，吸附罐(2)，离子交换柱(3)和沉淀罐(5)之间通过管道连接，管道上设置有启闭阀门(6)；所述离子交换柱(3)的上端设有排气管(31)，在离子交换柱(3)的外侧壁上设置有放液管(32)；所述试剂配制罐(4)位于离子交换柱(3)上方，所述试剂配制罐(4)的底部设有两个出液管，出液管I(41)与离子交换柱(3)的进液口I(33)连接，出液管II(42)与离子交换柱(3)的进液口II(34)连接，所述出液管II(42)设置有电泵(7)；所述出液管I(41)和出液管II(42)上也设置有启闭阀门(6)；所述反应罐(1)内的底部设置有滤网(11)；所述反应罐(1)顶部设置有进液口(12)和进料口(13)；利用该生产装置制备肝素钠的方法，包括以下步骤：1)溶解：在反应罐(1)中加入粘膜或初级肝素钠及氯化钠后加入水介质混溶至其全部溶解得溶液；2)酶解：溶解完全后在反应罐(1)中加入蛋白酶进行酶解，灭活后得酶解液，过滤或离心不溶杂质后转移到吸附罐(2)；3)吸附：所述酶解液进入吸附罐(2)后上离子交换柱(3)中进行保温吸附；4)洗涤：在试剂配制罐(4)中依次配制试剂A、试剂B和试剂C，控制上柱速率，上离子交换柱(3)进行正反洗涤，导出洗涤液；5)洗脱：步骤4)洗涤后用试剂D对碱性阴离子交换树脂进行两次洗脱；6)沉淀干燥：收集合并的洗脱液进入到沉淀罐(5)，加入乙醇得试剂E再沉淀，去掉上清液后对沉淀进行干燥，得粗品肝素钠；其中试剂A：质量体积百分比为2～5％的氯化钠水溶液；试剂B：质量体积百分比为3～6％的氯化钠水溶液；试剂C：质量体积百分比为4～7％的氯化钠水溶液；试剂D：质量体积百分比为8～20％的氯化钠水溶液；试剂E：乙醇肝素钠水溶液，所述乙醇肝素钠水溶液中乙醇的浓度为20～40°。