[发明专利]一种猪多杀性巴氏杆菌病抗原的制备方法及应用

摘要

本发明公开一种猪多杀性巴氏杆菌病抗原的制备方法，其特征在于，该方法的操作步骤如下培养基的制备和消毒、细菌接种和细菌培养；细菌接种完毕后，37℃静止培养1小时，继续通气培养，在通气培养到7‑10小时内向发酵罐内添加一定量的经灭菌的新鲜培养基，然后继续通气培养直至活菌数达到最高峰，培养结束，收获抗原进行各项检测，2～8℃保存备用。该发明在细菌培养的中后期增加了新鲜培养基，及时对细菌发酵消耗的营养成分进行了有效的补充，同时稀释有害代谢产物，因而使得培养菌数有明显的增长，能够大大提高活菌的数目，降低抗原的使用量，同时，提高疫苗质量，并降低生产成本。

主权项

一种猪多杀性巴氏杆菌病抗原的制备方法，其特征在于，该方法的操作步骤如下：（1）、培养基的制备和消毒：领取猪肺疫干粉培养基，按照每次培养10万毫升/罐的比例加入注射用水进行配制，然后在116℃的温度下，在发酵罐内持续30分钟的消毒灭菌，最后冷却至37℃准备接种；（2）、细菌接种：将上述步骤（1）制得的培养基按照培养基总量的2%接种细菌种子液，将保存备用的细菌种子液2000ml移入无菌室，同时，按发酵罐培养基总量加入0.1%裂解血球全血，最后连接接种的各路管道，利用洁净空气将菌种压入发酵罐内；（3）、细菌培养：细菌接种完毕后，37℃静止培养1小时，继续通气培养，在通气培养到7‑10小时内向发酵罐内添加一定量的上述步骤（1）所制得的经灭菌的新鲜培养基，然后继续通气培养直至活菌数达到最高峰，培养结束，收获抗原进行各项检测，2～8℃保存备用。