[发明专利]检测CYP2C9和VKORC1基因多态性的引物、探针和试剂盒

摘要

本发明公开了检测CYP2C9和VKORC1基因多态性的引物、探针和试剂盒，包括CYP2C9*2、CYP2C9*3和VKORC1三个位点的基因多态性检测特异性引物序列和探针序列(SEQ ID NO.1～12)。本发明运用ARMS引物区分野生型和突变型基因，具有灵敏度高、特异性强的优点，适用于多种样本类型，检测结果准确度高。另外，ARMS引物合成快速简单，合成成本低，能够有效降低生产成本，而且扩增效果更佳。该试剂盒检测速度快，整个检测过程只需要90分钟，十分方便。整个试剂盒不包含有毒有害物质，对操作人员和环境无危害，适合临床检测等广泛使用。

主权项

一组检测CYP2C9和VKORC1基因多态性的引物和探针，其特征在于，包括以下核苷酸序列：(1)检测CYP2C9*2多态性的突变型上游引物、野生型上游引物以及公用的下游引物和探针：CYP2C9*2野生型ARMS上游引物：5’‑GGGGAAGACGAGCATTGAGGAAC‑3’，CYP2C9*2突变型ARMS上游引物：5’‑ATGAGGAAGAGGAGCATTGAGGATT‑3’，CYP2C9*2公用的下游引物：5’‑GGTCACCCACCCTTGGTTTTTCT‑3’，CYP2C9*2公用的探针：5’‑FAM/CAAGAGGAAGCCCGC/MGB‑3’；(2)检测CYP2C9*3多态性的突变型上游引物、野生型上游引物以及公用的下游引物和探针：CYP2C9*3野生型ARMS上游引物：5’‑GCACGATGTCCAGAGATAGA‑3’，CYP2C9*3突变型ARMS上游引物：5’‑GCACGATGTCCAGAGATAGC‑3’，CYP2C9*3公用的下游引物：5’‑CTTACCTTGGGAATGAGATAGT‑3’，CYP2C9*3公用的探针：5’‑FAM/ACCAGCCTGCCCCAT/MGB‑3’；(3)检测VKORC1基因‑G1639A多态性的突变型上游引物、野生型上游引物以及公用的下游引物和探针：VKORC1位点野生型ARMS上游引物：5’‑TAGACGTGAGCCACCGCAACC‑3’，VKORC1位点突变型ARMS上游引物：5’‑TAGGCGTGAGCCACCGCAACT‑3’，VKORC1位点公用的下游引物：5’‑GGGAAATATCACAGACGCCAGAGGA‑3’，VKORC1位点公用的探针：5’‑FAM/ATCCCTTACTGTTGCAC/MGB‑3’；所述探针均为MGB探针，探针核苷酸序列5’端标记荧光报告基团，3’端标记荧光淬灭基团。