[发明专利]一种苦蘵的组织培养方法

摘要

本发明公开了一种苦蘵的组织培养方法，该方法包括以下步骤：种子无菌萌发、诱导愈伤组织、愈伤组织分化、生根培养和炼苗及移栽。本发明的方法用于苦蘵的组织培养，具有繁殖速度快、繁殖系数大，繁殖后代整齐一致，能保持原有品种的优良性状，不受季节的限制的优点。

主权项

1.一种苦蘵的组织培养方法，其特征在于该方法包括以下步骤：(1)种子无菌萌发：苦蘵种子经酒精、次氯酸钠及吐温灭菌，然后无菌水冲洗，最后均匀播种在1/2MS培养基上，种子萌发出小苗；培养条件是无菌环境下，培养温度为25±1℃，光周期为16h光照/8h黑暗，培养时间为12～14天；(2)诱导愈伤组织：将种子萌发后小苗的子叶切下，切去叶子两端，然后接种在含有6‑BA和NAA的改良MS培养基上，得到愈伤组织；培养条件是无菌环境下，培养温度为25±1℃，光周期为16h光照/8h黑暗，培养时间为35～42天；(3)愈伤组织分化：将获得的愈伤组织接种在含6‑BA和NAA的改良MS培养基上，得到组培小苗；培养条件是无菌环境下，培养温度为25±1℃，光周期为16h光照/8h黑暗，培养时间为14～16天；(4)生根培养：待愈伤上的不定芽长到2‑3cm时，用剪刀剪下小苗，转接在1/2MS培养基上，得到生根组培苗；培养条件是无菌环境下，温度为25±1℃，光周期为16h光照/8h黑暗，培养时间为12～15天；(5)炼苗及移栽：待小苗长出白色且粗壮的根后，进行驯化移栽；具体驯化移栽过程是首先在培养室将瓶盖打开炼苗2‑3天，然后取出植株，洗净根部培养基，移栽；炼苗培养条件为往组培瓶中加入0.5‑1cm蒸馏水，打开瓶盖，置于培养温度为25±1℃，光周期为16h光照/8h黑暗的培养室中炼苗2‑3天；移栽条件是采用花卉营养土与蛭石的混合物作为培养基质，置于26℃光照培养箱，光周期为16h光照/8小时黑暗；所述步骤(2)、(3)改良MS培养基的配制方法为：配置1L培养基是将MS培养基固体粉末4.74g、2‑吗啉乙磺酸1g、蔗糖30g，溶解于蒸馏水中，然后将pH值调至5.8～6.0后定容至1L，最后加入1.0‑3.0mg/L 6BA和0.05‑0.2mg/L NAA，以及8g琼脂粉。