[发明专利]一种生物羊膜的制备方法

摘要

本发明公开了一种生物羊膜的制备方法，通过原料预处理、一系列化学处理、干燥、灭菌，得到生物羊膜。本发明的生物羊膜的制备方法是通过高渗盐水破坏羊膜细胞结构，再用DNA酶分解细胞破裂后暴露的DNA，在更为彻底的降低免疫原性同时还保留了羊膜的其他组成结构，如蛋白网架，使羊膜在临床使用中更好的发挥效用，同时整个过程中所使用的试剂残留量少、化学性质柔和，不会影响人体健康。

主权项

一种生物羊膜的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括以下步骤：1)原料预处理：将胎盘放入第一溶液中，清除血块，使羊膜和绒毛膜与胎盘分离，并将羊膜和绒毛膜分离，得到预处理羊膜；所述第一溶液为生理盐水；2)化学处理：①在步骤1)得到的预处理羊膜中加入第二溶液，在轨道式摇床处理一段时间，去掉第二溶液，得到一次处理羊膜；所述第二溶液为3M NaCl溶液；②向一次处理羊膜中加入第三溶液，在轨道式摇床处理一段时间，去掉第三溶液，重复不少于2次，得到二次处理羊膜；所述第三溶液为灭菌纯化水；③向二次处理羊膜中加入第四溶液，在轨道式摇床处理一段时间，去掉第四溶液，得到三次处理羊膜；所述第四溶液为去DNA溶液，由0.5M CaCl2、0.5M MgCl2、0.5M HEPES、纯化水按0.2：1：4：195比例混合，加入DNA酶制成0.25mg/mL溶液；④向三次处理羊膜中加入第五溶液，在轨道式摇床处理一段时间，去掉第五溶液，得到四次处理羊膜；所述第五溶液为pH7.0磷酸盐缓冲溶液；⑤向四次处理羊膜中加入第三溶液，在轨道式摇床处理一段时间，去掉第三溶液，得到五次处理羊膜；⑥向五次处理羊膜中加入第六溶液，在轨道式摇床处理一段时间，去掉第六溶液，得到六次处理羊膜；所述第六溶液为70％异丙醇溶液；⑦向六次处理羊膜中加入第三溶液，在轨道式摇床处理一段时间，去掉第三溶液，重复不少于1次，得到七次处理羊膜；3)将步骤2)得到的七次处理羊膜进行干燥、灭菌，得到生物羊膜。