[发明专利]一种透明质酸钠的生产工艺

摘要

本发明公开了一种透明质酸钠的生产工艺。本发明筛选出透明质酸产率高的菌种，结合改进的发酵技术，生产周期短，生产工艺简单，原辅料常见易得，生产易于控制，杂质含量更低，适合工业化大规模生产要求，收率高，并且大大降低了生产成本。

主权项

1.一种透明质酸钠的生产工艺，其特征在于，包括以下步骤：（1）马链球菌兽疫亚种（Streptococcus equi subsp. zooepidemicus）DCS005摇瓶种子液培养，培养条件为：38.5℃培养12-16小时；（2）菌种扩大培养，培养条件为温度38.5℃、pH7.0-7.3，培养时间为12-16小时，罐压0.05MPa；（3）发酵，通入无菌含氧空气37-40℃发酵18-32小时后，通入氮气39-45℃继续发酵，通入氮气阶段同时加入浓度为800g/L的葡萄糖300mL，发酵液pH每分钟下降幅度小于0.01时结束发酵，检测发酵液粘度，将发酵液压入沉淀罐中，其中，发酵罐罐压0.05MP；（4）将发酵液加水稀释至发酵液体积的6-8倍，向稀释液中加入硅藻土和活性炭，40℃保温搅拌后板框压滤，收集滤液；对滤液进行超滤；硅藻土加入量为发酵液体积的2%，活性炭加入量为发酵液体积的2%；超滤所用超滤膜截留分子量为30,000-50,000，超滤在0.5MPa以下进行；（5）将超滤后的溶液加入 0.6mol/L 的氯化钠，待完全溶解后加入乙醇，沉淀至终点酒精度数为60％-65％，充分搅拌，静置沉淀，取出沉淀物透明质酸钠；将上清液抽滤，然后流加0.3-2倍体积的无水乙醇，离心后收集沉淀；（ 6） 洗涤脱水干燥：将透明质酸钠沉淀物用乙醇洗涤、脱水后真空干燥，即得透明质酸钠成品；所述的马链球菌兽疫亚种（Streptococcus equi subsp. zooepidemicus）DCS005，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏，其保藏编号是：CGMCC No.12782，保藏日期是2016年7月14日；步骤（1）、（2）、（3）中的培养液包括按重量百分比的淀粉1%、蔗糖0.5%、牛肉膏0.5%、酵母粉0.5%、磷酸氢二钾0.02%、氢氧化钠0.05%，余量为水，pH7.0-7.3。