[发明专利]一种基于单通道的多色超分辨显微系统及方法

摘要

本发明公开了一种基于单通道的多色超分辨显微系统和方法，包括损耗光源、第一准直单元、位相板、第一激发光源、第一二色镜、第二准直单元、半波片、偏振分束镜、第二激发光源、第一探测器、第二二色镜、透镜‑针孔‑透镜组、第三二色镜、扫描镜、第二探测器、第三准直单元、四分之一波片、显微物镜和样品台。本发明采用一个损耗光源即可实现两色(或多色)的超分辨显微，系统架构简单，成本较低。本发明可以克服以往单通道多色超分辨系统中能量损失大和串扰带来的较强的背景噪声，工作精度高，结果准确。因此，本发明与原有技术相比，能够提高多色超分辨显微系统的工作效率和实验精度，并有效降低成本。

主权项

1.一种基于单通道的多色超分辨显微系统，其特征在于，包括损耗光源、第一准直单元、位相板、第一激发光源、第一二色镜、第二准直单元、半波片、偏振分束镜、第二激发光源、第一探测器、第二二色镜、透镜‑针孔‑透镜组、第三二色镜、扫描镜、第二探测器、第三准直单元、四分之一波片、显微物镜和样品台；所述损耗光源依次经过所述第一准直单元、位相板到达偏振分束镜的一个入射面；所述第一激发光源发出的激发光束与第二激发光源发出的激发光束在第一二色镜处合束，合束光依次通过第二准直单元、半波片后，到达偏振分束镜的另一个入射面；所述合束光与损耗光束在偏振分束镜合束后，经过所述第三二色镜表面，到达扫描镜表面，然后依次经过第三准直单元、四分之一波片和显微物镜汇聚到样品台上的样品表面，所述样品被两种荧光染料提前标定；由所述样品表面产生的荧光，依次通过所述显微物镜、所述四分之一波片、所述第三准直单元和所述扫描镜后，再透射通过第三二色镜然后依次经过透镜‑针孔‑透镜组，到达第二二色镜表面；入射至第二二色镜的荧光一部分透射通过第二二色镜，被聚焦后由第一探测器接收，另一部分经过第二二色镜反射的荧光被聚焦后由第二探测器接收；所述第一探测器和第二探测器上分别安装有通道一滤波片和通道二滤波片；所述荧光中包括两种光谱，分别为荧光光谱一和荧光光谱二；所述通道一滤波片过滤掉其它光谱仅仅保留荧光光谱一中没有与荧光光谱二叠加的部分，所述通道二滤波片过滤掉荧光光谱中波长大于激发光的部分，仅保留荧光光谱一与荧光光谱二叠加的部分；所述两种荧光染料选自ATTO594、ATTO647N、ATTO590、SiR、Alexa635P、KK140中的两种。