[发明专利]一种刨花润楠的组培繁殖方法

摘要

本发明涉及一种刨花润楠的组织培养方法，属于植物组织培养技术领域；该方法是通过外植体处理、消毒，不同激素种类及浓度水平配比优化，以刨花润楠种子为外植体，经过不定芽诱导、芽增殖培养和生根培养，形成完整植株。该发明弥补了以刨花润楠优树种子为外植体进行组培快繁的空白，提供了一种稳定、快速的刨花润楠组培繁殖方法，为实现刨花润楠优良种质快速推广、提高刨花润楠人工林的经济效益提供技术支撑。

主权项

1.一种刨花润楠的组培繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)外植体采集与处理：选取生长健壮、树型圆满、无病虫害，树高10m以上的刨花润楠为采种母树，种子采集后，清水浸泡2～3d，搓掉外种皮，冲洗干净后，挑选出种实饱满，无病虫害的种子，用1000mg/L的GA3溶液浸泡种子60min；(2)外植体表面消毒：在超净工作台上先将刨花润楠种子小心剥去膜质内种皮，注意不要伤及种胚，加入0.1％升汞溶液，浸泡12min，其间不断摇动，倒掉升汞溶液用无菌水冲洗5～6次；(3)芽诱导：将消毒好的种子接种到芽诱导培养基进行培养，每瓶接种一粒种子；5d之后，胚开始萌动；(4)丛芽增殖：将步骤(3)萌发后培养25～30d的芽切下，切为2～3cm茎段，转接到增殖培养基中进行增殖培养；首先将茎段在添加AgNO30.5～2.0mg/L的增殖培养基中预培养10d，然后转接到不含AgNO3的增殖培养基中培养30d，诱导不定芽，形成新芽丛；(5)生根培养：步骤(4)得到的增殖芽丛中芽高超过2cm的嫩茎切下，接入生根培养基；(6)生根苗移栽：将生根培养20d的生根瓶苗移到温室中适应外界环境5～7d，然后将组培瓶盖从半开到全开炼苗1d，将组培苗小心取出，洗净粘于根上的培养基，移栽到泥炭土：珍珠岩＝3：1混合基质上，移栽后前20d采用盖膜保湿，然后揭开薄膜按常规幼苗管理；步骤(4)所述的培养是先在MS培养基+6‑BA 1.0～3.0mg/L+IBA 0.01～0.1mg/L+AgNO30.5～2.0mg/L+蔗糖25～40g/L+卡拉胶8g/L上预培养10d，再转入MS培养基+6‑BA 1.0～3.0mg/L+IBA 0.01～0.1mg/L+蔗糖25～40g/L+卡拉胶8g/L中培养30d。