[发明专利]猫弓形虫血清抗体的Dot‑ELISA快速检测试剂盒

摘要

本发明具体公开了一种猫弓形虫血清抗体的Dot‑ELISA快速检测试剂盒，本试验将硝酸纤维素膜(NC)打孔后固定于96孔板内，将弓形虫SAG3蛋白包被于NC膜上，加入待检抗体与其发生反应，再通过加入酶标二抗使其形成抗原‑抗体复合物。加入显色液，终止反应后对结果进行判断。如NC膜上斑点呈棕色则判定为阳性，无颜色变化的判定为阴性。应用重组抗原包被NC膜可延长保存时间。膜片可拆开单独保存，避免了NC膜的污染。本发明具有较高的灵敏性和特异性，不需要特殊的仪器，可进行大规模的血清样品的筛选，实际应用价值较大。

主权项

检测弓形虫血清抗体的间接Dot‑ELISA试剂盒，其特征在于主要由以下部分组成：主要包括包被抗原、包被液、封闭液、样品稀释液及洗涤液、辣根过氧化物酶标记的二抗、底物显色液、试验终止液、阳性参照血清、阴性参照血清、96孔可拆聚苯乙烯塑料反应板；包被抗原为弓形虫表面蛋白SAG3(蛋白浓度为1.2μg/μL)；包被液为0.05M碳酸盐缓冲液PH（9.6）；封闭液为5%的脱脂奶粉；样品稀释液及洗涤液为0.5% Tween‑20的磷酸盐缓冲液（PBST）；辣根过氧化物酶标记的二抗为山羊抗猫IgG；底物显色液为TMB溶液；终止液为2mol/L 的硫酸溶液（H2SO4）；阳性参照血清及阴性参照血清。