[发明专利]一种同时检测五种禽垂直传播疾病抗体的液相芯片及方法

摘要

本发明公开了一种同时检测五种禽垂直传播疾病抗体的液相芯片及方法。所述液相芯片中含有将不同编码的磁珠与五种禽垂直传播疾病的表面抗原偶联得到五种荧光编码微球；生物素标记的检测抗体；链霉亲和素藻红蛋白等。本发明还公开了上述液相芯片免疫磁珠的制备方法，可以高特异性，高通量同时检测五种禽垂直传播疾病，并且整个过程操作简单，快速准确，可以实现高通量检测。

主权项

1.一种同时检测五种禽垂直传播疾病抗体的液相芯片，其特征在于：该液相芯片中含有偶联磁珠、检测抗体和报告分子；所述偶联磁珠为5种分别偶联有禽流感病毒NP蛋白、禽新城疫病毒NP蛋白、禽呼肠孤病毒δC蛋白、禽白血病病毒P27蛋白、禽网状内皮组织增生病毒env蛋白的偶联磁珠；所述偶联磁珠的制备方法为：将5种不同编码的空白磁珠活化后，用偶联缓冲液重悬磁珠；漩涡震荡，超声波分散处理后，分别加入禽流感病毒NP蛋白溶液、禽新城疫病毒NP蛋白溶液、禽呼肠孤病毒δC蛋白溶液、禽白血病病毒P27蛋白溶液、禽网状内皮组织增生病毒env蛋白溶液中，混匀后35~39℃避光下进行偶联反应2~4h，离心去上清；得5种包被有不同抗原的磁珠，即得偶联磁珠；所述偶联缓冲液为0.05~0.2M的乙磺酸缓冲液，其pH为5.5~6.5；所述蛋白溶液的浓度为1~10μg/mL。