[发明专利]一种南极磷虾中吡咯并[1;2-a]吡嗪-1;4-二酮;六氢-3-(苯基甲基)的提取纯化及检测方法

摘要

本发明公开了一种南极磷虾中吡咯并[1,2‑a]吡嗪‑1,4‑二酮,六氢‑3‑(苯基甲基)的提取纯化及检测方法，包括向南极磷虾中加入甲醇进行回流提取，过滤，得滤液；滤液蒸发浓缩得甲醇膏；向甲醇膏中加入乙醚浸提，过滤得乙醚液；乙醚液蒸发后得乙醚浸膏；乙醚浸膏加入适量乙醚溶解后，得乙醚浸膏液，再向其中加入硫酸水溶液搅拌萃取，萃取得酸水层；向酸水层中加入氯仿进行萃取，静置分液得氯仿层A；向所得氯仿层A中加入氢氧化钠水溶液萃取，静置分液得碱水层和氯仿层B；将所得氯仿层B蒸发除溶剂，即得Cyclo(Pro‑Phe)。同时采用气相色谱‑质谱法(GC‑MS)对所得Cyclo(Pro‑Phe)分析检测。本发明以南极磷虾为原料，首次从中提取纯化并检测出Cyclo(Pro‑Phe)，对南极磷虾开发具有重要意义。

主权项

1.一种南极磷虾中吡咯并[1,2‑a]吡嗪‑1,4‑二酮,六氢‑3‑(苯基甲基)的提取纯化方法，其特征在于，提取纯化步骤如下：（1）向南极磷虾中加入甲醇进行回流提取，过滤，得滤液；滤液蒸发浓缩得甲醇膏；（2）向步骤（1）中的甲醇膏中加入乙醚浸提，过滤得乙醚液；乙醚液蒸发后得乙醚浸膏；（3）步骤（2）的乙醚浸膏加入适量乙醚溶解后，得乙醚浸膏液，再向其中加入硫酸水溶液搅拌萃取，萃取得酸水层；（4）向步骤（3）所得酸水层中加入氯仿进行萃取，静置分液得氯仿层A；（5）向步骤（4）所得氯仿层A中加入氢氧化钠水溶液萃取，静置分液得碱水层和氯仿层B；（6）将步骤（5）所得氯仿层B蒸发除溶剂，即得Cyclo(Pro‑Phe)；所述步骤（1）中，所述南极磷虾在加入甲醇前先经过冷冻干燥处理；所述南极磷虾与甲醇加入量的质量体积比为1g: (6‑10)mL，提取温度为80℃，甲醇回流提取的次数为7‑9次，每次提取的时间为1‑2h；所述步骤（2）中，甲醇膏与乙醚加入量的比为1g: (4‑6)mL，加入乙醚进行浸提的次数为4‑6次，每次浸提的时间为0.5‑1h；所述步骤（3）中，乙醚浸膏与乙醚加入量的质量体积比为1g：10mL；所述乙醚浸膏液与硫酸水溶液加入量的体积比为1: (10‑30)；所述硫酸水溶液的体积分数为2%；所述步骤（4）中，酸水层中与氯仿体积比为1:1；氯仿与酸水层搅拌萃取次数为6‑7次，每次搅拌时间为0.5~1.5h；所述步骤（5）中，氯仿层A和氢氧化钠水溶液的体积比为1~2：1；所述氯仿层A与所述氢氧化钠水溶液搅拌萃取次数为6‑7次，每次搅拌时间为0.5~1.5h。