[发明专利]一种艾滋病病毒多重荧光PCR检测试剂盒及检测方法

摘要

本发明公开了一种艾滋病病毒多重荧光PCR检测试剂盒及检测方法，所述试剂盒包括PCR反应试剂、标签引物Tag、LTR基因特异性引物和探针、GAG基因特异性引物和探针、RNase P内控靶基因引物和探针；本发明试剂盒对艾滋病病毒HIV前病毒DNA核酸的检测简便快速，具有高度的特异性和灵敏度，检出限可达20拷贝/反应；该方法可直接从全血或外周血淋巴细胞富积液样本中检测HIV病毒核酸，从核酸提取到完成检测少于3.5小时，有利于HIV感染诊断尤其是HIV窗口期患者、HIV抗体不确定者、婴儿感染早期诊断等。

主权项

一种艾滋病病毒多重荧光PCR检测试剂盒，其特征在于所述试剂盒包括PCR反应试剂、标签引物Tag、LTR基因特异性引物和探针、GAG基因特异性引物和探针、RNase P内控靶基因引物和探针：标签引物Tag：5'‑GCAAGCCCTCACGTAGCGAA‑3'；LTR上游引物：5'‑Tag‑GCCTCAATAAAGCTTGCC‑3’；LTR下游引物：5'‑Tag‑GGCGCCACTGCTAGAGATTTT‑3’；LTR荧光探针：5'‑FAM‑AAGTRGTGTGTGCCC‑BHQ1‑3'；GAG上游引物：5'‑Tag‑TTTTGACTAGCGGAGGCTAGAAG‑3’；GAG下游引物：5'‑Tag‑CYCTGCTTGCCCATACTATATGTT‑3’；GAG荧光探针：5'‑HEX‑ATGGGTGCGAGAGCGTCAGTATTAAG‑BHQ1‑3’；RNase P上游引物：5'‑Tag‑AGATTTGGACCTGCGAGCG‑3’；RNase P下游引物：5'‑Tag‑GAGCGGCTGTCTCCACAAGT‑3’；RNase P荧光探针：5'‑CY5‑TTCTGACCTGAAGGCTCTGCGCG‑BHQ2‑3'；其中，FAM、HEX和CY5为荧光报告基团，BHQ1和BHQ2为荧光淬灭基团。