[发明专利]一种逐步放大T细胞培养方法在审
| 申请号： | 201610482997.8 | 申请日： | 2016-06-24 |
| 公开（公告）号： | CN106399238A | 公开（公告）日： | 2017-02-15 |
| 发明（设计）人： | 徐华栋;许国贞;刘振云;钱鹏;王庆丽;何丽 | 申请（专利权）人： | 安徽未名细胞治疗有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 合肥市长远专利代理事务所(普通合伙)34119 | 代理人： | 程笃庆,黄乐瑜 |
| 地址： | 230000 安徽省合肥*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种逐步放大T细胞培养方法，包括如下步骤将人外周血单个核细胞重悬于分选培养基中进行分选培养，取出未贴壁的细胞置于已包被的培养瓶中，再向培养瓶中加入IFNγ，然后静置培养，第二天再向培养瓶中加入IL‑1α、IL‑2继续培养；当培养瓶中的T细胞密度≥1～2×106cell/mL时，再向培养瓶中加入GT‑T551培养基和IL‑2进行放大培养；当培养瓶中的T细胞密度≥1～2×106cell/mL时，再向培养瓶中加入GT‑T551培养基和IL‑2进行放大培养；重复S3的操作，然后当培养瓶中的T细胞密度≥1～2×106cell/mL时，再加入GT‑T551培养基和IL‑2进行最终放大培养。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 逐步 放大 细胞培养 方法 | ||
【主权项】：
一种逐步放大T细胞培养方法，其特征在于，包括如下步骤：S1、按体积份数将人外周血单个核细胞重悬于38～42份分选培养基中进行分选培养，其中人外周血单个核细胞与分选培养基的个数体积比(个/mL)为1～1.6×108：38～42，取出未贴壁的细胞置于已包被的培养瓶中，再向培养瓶中加入IFNγ，然后静置培养，第二天再向培养瓶中加入IL‑1α、IL‑2继续培养；S2、当培养瓶中的T细胞密度≥1～2×106cell/mL时，再向培养瓶中加入38～42份GT‑T551培养基和IL‑2进行放大培养；S3、当培养瓶中的T细胞密度≥1～2×106cell/mL时，再向培养瓶中加入76～84份GT‑T551培养基和IL‑2进行放大培养；S4、重复S3的操作至培养瓶体积为310～330份，然后当培养瓶中的T细胞密度≥1～2×106cell/mL时，再加入670～690份GT‑T551培养基和IL‑2进行最终放大培养。
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